C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
N
C12N 15/12 (2006.01) A01K 67/027 (2006.01) C07K 14/47 (2006.01) C07K 14/82 (2006.01) C07K 16/18 (2006.01) C12N 5/06 (2006.01) C12N 5/08 (2006.01) C12N 7/01 (2006.01) C12N 15/10 (2006.01)
Patent
CA 2192689
This invention provides a method of indentifying a tumor suppressor gene of a cell(s) which comprises the following steps: a) obtaining cDNA or mRNA from a normal cell(s); b) preparing cDNA from the cell(s) if mRNA is obtained in step (a); c) preparing a library from said cDNA, wherein the cDNA is under control of an inducible expression control system which also carries a selectable gene; d) introducing the vector library into a population of cell(s) expressing a transformed phenotype; e) placing the introduced transformed cell(s) from step (d) in conditions permitting expression of the cDNA and an effective concentration of an appropriate selection agent to select the cell(s) expressing the selectable gene; f) identifying the cell(s) which express the normal phenotype; and g) analyzing the cell(s) so identified so as to characterize the DNA and thus identify the tumor suppressor gene. Analogous methods to identify tumor suppressors in normal cells and to identify genes associated with unknown genetic defects are also described.
L'invention concerne un procédé d'identification d'un gène suppresseur de tumeur d'une ou plusieurs cellules, qui consiste à: a) obtenir de l'ADNc ou de l'ARNm à partir d'une ou plusieurs cellules normales; b) préparer de l'ADNc à partir de la ou des cellules si de l'ARNm est obtenu dans la phase (a); c) préparer un banque à partir dudit ADNc, lequel est sous le contrôle d'un système de régulation d'expression inductible qui porte également un gène sélectionnable; d) introduire la banque de vecteurs dans une population d'une ou plusieurs cellules exprimant un phénotype transformé; e) mettre la ou les cellules transformées provenant de la phase (d) dans des conditions permettant l'expression de l'ADNc et une concentration efficace d'un agent de sélection approprié pour sélectionner la ou les cellules exprimant le gène sélectionnable; f) identifier la ou les cellules exprimant le phénotype normal; et g) analyser la ou les cellules ainsi identifiées pour caractériser l'ADN et identifier ainsi le gène suppresseur de tumeur. Des méthodes analogues d'identification de suppresseurs de tumeur dans des cellules normales et d'identification de gènes associés à des anomalies génétiques inconnues sont également décrites.
Gowling Lafleur Henderson Llp
The Trustees Of Columbia University
LandOfFree
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Profile ID: LFCA-PAI-O-1347522