A - Human Necessities – 61 – K
Patent
A - Human Necessities
61
K
A61K 39/385 (2006.01) A61K 39/085 (2006.01) C07K 16/12 (2006.01)
Patent
CA 2342783
A process is disclosed for obtaining a C-polysaccharide cell wall antigen containing not more than about 10 % protein from Streptococcus pneumoniae bacteria. The antigen thus obtained is conjugated to a spacer molecule, and the free end of the latter is then conjugated to a chromatographic affinity column. The column is then utilized to purify raw antibodies to S. pneumoniae bacteria, thereby producing antigen-specific antibodies. A portion of such antibodies is conjugated to a labeling agent which displays a visible color change upon reaction of the antibodies with their antigenic binding partner and embedded in a first zone of an immunochromatographic assay device. Another portion of such antibodies is bound to the reaction zone of the device which has a view window. When a liquid sample, such as patient urine, cerebrospinal fluid or blood is applied to the first zone, the conjugate of antibodies and labeling agent and the sample move along a flow strip of bibulous material to the reaction zone wherein, if the sample contains S. pneumoniae or its cell wall antigen, a sandwich is formed among the labeled conjugate, the antigen and the bound antibodies and a color change is observed. The immunochromatographic assay thus performed is completed within about 15 minutes. This assay affords a basis for rapid and reliable diagnosis of various pathogenic states caused by S. pneumoniae including pneumonia, bronchitis, otitis media, sinusitis, meningitis, and secondary disease states that commonly occur when primary pneumonic infection caused by this bacterium persists undiminished over a time period of 3-5 days.
La présente invention concerne un procédé permettant l'obtention d'un antigène de la paroi C-polysaccharidique de la cellule ne contenant pas plus qu'environ 10 % de protéine de la bactérie Streptococcus pneumoniae. L'antigène ainsi obtenu se conjugue à une molécule intercalaire, à la suite de quoi l'extrémité libre de cette dernière se conjugue à une colonne à affinité chromatographique. Cette colonne sert ensuite à purifier des anticorps bruts de S. pneumoniae, ce qui aboutit à la production d'anticorps spécifique de l'antigène. Une partie de tels anticorps se conjugue ensuite à un agent de marquage qui présente un changement de couleur visible dès la réaction des anticorps avec leur partenaire de liaison antigénique, puis s'imbriquent dans une première zone d'un dispositif d'essai immunochromatographique. Une autre partie de tels anticorps se lie à la zone de réaction du dispositif qui est pourvu d'une fenêtre d'observation. Lorsqu'on applique sur la première zone un échantillon de fluide du patient tel que de l'urine, du liquide céphalo-rachidien ou du sang, le conjugué des anticorps et de l'agent de marquage ainsi que l'échantillon se déplace le long de la bande d'écoulement de la matière buvard de la zone de réaction. Il en résulte que, si l'échantillon contient S. pneumoniae ou son antigène de paroi cellulaire, une structure sandwich se forme entre le conjugué marqué, l'antigène et les anticorps liés, ce qui donne lieu à l'observation d'un changement de couleur. L'essai immunochromatographique ainsi réalisé s'achève en environ 15 minutes. Cet essai constitue une base de diagnostic rapide et fiable de différentes pathologies à S. pneumoniae telles que pneumonies, bronchites, otites moyennes, méningites, et autres pathologies secondaires survenant généralement lorsque l'infection pulmonaire primaire provoquée par cette bactérie persiste au-delà d'une période de 3 à 5 jours.
Fent Mary Kathleen
Koulchin Vladimir Andrei
Molokova Elena Valentin
Moore Norman James
Binax Inc.
Sim & Mcburney
LandOfFree
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