Method for inducing differentiation of mesodermal stem...

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N

Patent

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C12N 5/079 (2010.01) C12N 5/0735 (2010.01) A61K 35/28 (2006.01) A61K 35/30 (2006.01) A61P 25/00 (2006.01) A61K 35/12 (2006.01)

Patent

CA 2465653

It is found out that, when mesodermal stem cells or ES cells prepared from mononuclear cell fraction separated from myeloid fluid or cord blood are cultured in a liquid fundamental culture medium, there arises induction of the differentiation of these mesodermal stem cells or ES cells into nerve stem cells, nerve cells or glial cells. It is also found out that the induction of the differentiation of the mesodermal stem cells or ES cells into nervous system cells is promoted by adding an ischemic brain extract to the liquid fundamental culture medium. It is further clarified that the nervous system cells thus obtained are capable of regenerating nerve in models of cerebral infarction, dementia, spinal injury and demyelination. Moreover, it becomes possible to induce the differentiation of mesodermal stem cells into nervous system cells by immortalizing the mesodermal stem cells by overexpressing or activating an immortalization gene therein and then culturing the cells under appropriate conditions. This method is highly useful in nerve regeneration therapy.

Selon l'invention, on a constaté que, lorsque l'on effectue la culture de cellules souches mésodermiques ou de cellules ES qui sont préparées à partir d'un fragment de cellule mononucléaire séparé d'un fluide myéloïde ou de sang ombilical, dans un milieu de culture fondamental liquide, il se produit une induction de la différenciation de ces cellules souches mésodermiques ou cellules ES dans des neurones souches, des neurones ou des cellules gliales. On a également constaté que l'induction de la différenciation des cellules souches mésodermiques ou des cellules ES dans les cellules du système nerveux est favorisée lorsque l'on ajoute un extrait de cerveau ischémique dans le milieu de culture fondamental liquide. Ensuite on détermine si les cellules du système nerveux ainsi obtenues sont capable de régénérer les nerfs dans des modèles d'infarctus cérébral, de démence, de lésion médullaire et de démyélination. En outre, il devient possible d'induire la différenciation des cellules souches immortalisées dans les cellules du système nerveux par l'immortalisation des cellules souches mésodermiques par surexpression ou activation d'un gène d'immortalisation de ces cellules et ensuite par culture des cellules dans des conditions adéquates. Ce procédé est hautement utile dans la thérapie de régénération des nerfs.

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