A - Human Necessities – 01 – N
Patent
A - Human Necessities
01
N
A01N 1/02 (2006.01) C12M 3/00 (2006.01) C12M 3/02 (2006.01) C12M 3/04 (2006.01) C12N 1/06 (2006.01) C12N 15/00 (2006.01) C12N 15/87 (2006.01)
Patent
CA 2314931
The present invention is directed to the method and apparatus for the cytoplasmic loading of macromolecules into living cells by an impact-mediated procedure that impacts the cells with a predetermined number of solid particles in a blast of propellant gas. More specifically, the present invention is directed to an impact-mediated procedure that is altered by gravitational conditions and is preferably carried out under hypergravity conditions. Further, the present invention is directed to an IML method and apparatus for consistently and reproducibly loading macromolecules into the cytoplasm of living cells via membrane wounding at significantly higher efficiencies than can be accomplished using existing methodologies. The IML procedure directs a blast of propellant gas through a rupturable membrane on which solid particles are supported in order to achieve insertion of a predetermined number of particles into the propellant blast. Another preferred embodiment is a particle containment shell that includes a particle support membrane that ruptures at a predetermined propellant blast pressure and has a predetermined number of particles on the surface of the support membrane.
La présente invention concerne un procédé et un appareil permettant le chargement cytoplasmique de macromolécules dans des cellules vivantes grâce à une procédure d'impact dans laquelle on frappe la cellule à l'aide d'un nombre prédéterminé de particules solides contenues dans un souffle de gaz propulseur. La présente invention fait appel, en particulier, à une procédure d'impact qui peut être modifiée par les conditions de pesanteur et qui se déroule, de préférence, dans des conditions d'hyperpesanteur. L'invention concerne en outre un procédé et un appareil de chargement par impact permettant de charger de façon régulière et reproductible des macromolécules dans le cytoplasme de cellules vivantes par déchirure de la membrane avec une efficacité sensiblement supérieure à celle des procédés actuels. Dans le procédé de chargement par impact de l'invention, on dirige un souffle de gaz propulseur à travers une membrane déchirable sur laquelle sont supportées des particules solides afin d'insérer un nombre prédéterminé de ces particules dans le gaz propulseur. Dans un autre mode de réalisation préféré, une enveloppe de retenue de particules supportant un nombre prédéterminé de particules comprend une membrane de support de particules qui se rompt à une pression de souffle de gaz propulseur prédéterminée.
Clarke Mark S. F.
Feeback Daniel L.
Lucas-Dean Rob G.
Vanderburg Charles R.
Withey Michael M.
Marks & Clerk
Oceaneering International Inc.
LandOfFree
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Profile ID: LFCA-PAI-O-1414100