C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
N
C12N 15/40 (2006.01) C07K 14/08 (2006.01) C12N 15/67 (2006.01) C12N 15/82 (2006.01)
Patent
CA 2077405
A DNA sequence encoding a potato leafroll virus coat protein having at least one internal translation initiation codon in a different reading frame than the native PLRV coat protein DNA sequence altered to a non-initiator codon is provided. Two translation initiation sites at the start of a 17kd open reading frame in a different reading frame than the native PLRV coat protein DNA sequence are preferably altered. A stronger stop codon is also provided in the modified PLRV DNA sequence. The modified DNA sequence having the internal translation initiation codons at the start of the 17kd open reading frame altered to non-initiator codons can be used in a gene to transform plants of the Solanaceae family to obtain transgenic plants resistant to PLRV. A synthetic modified potato leafroll virus DNA sequence is also provided which has the changes in the translation initiation sites and is further made to be more "plant-like". Multiple copies of the modified or synthetic modified PLRV coat protein DNA sequence driven by different promoters have also been transformed into potato with advantageous results. The modified potato leafroll virus DNA sequences of this invention are particularly useful in obtaining transgenic potato plants resistant to infection by potato leafroll virus.
Une séquence d'ADN codant une protéine de coque du virus de l'enroulement de la pomme de terre (PLRV), dont au moins un codon interne initiateur de la traduction, situé dans un autre cadre de lecture que la séquence d'ADN codant la protéine de coque native du PLRV, a été modifié en un codon non initiateur. Deux sites initiateurs de la traduction situés au début d'un cadre de lecture ouvert de 17 kd, dans un autre cadre de lecture que la séquence d'ADN codant la protéine de coque native du PLRV, sont modifiés de préférence. La séquence d'ADN de PLRV modifiée renferme en outre un codon de terminaison plus puissant. La séquence d'ADN modifiée dont les codons internes initiateurs de la traduction situés au début du cadre de lecture de 17kd ont été modifiés en des codons non initiateurs peut être utilisée à l'intérieur d'un gène pour transformer les végétaux de la famille des Solanacées en végétaux transgéniques résistant au PLRV. Une séquence synthétique d'ADN de PLRV a également été obtenue par modification des sites initiateurs de la traduction de manière à ressembler davantage à une séquence d'origine végétale. Des copies multiples de la séquence modifiée ou synthétique d'ADN codant une protéine de coque du PLRV, régies par des promoteurs différents, ont également été introduites chez la pomme de terre avec des résultats avantageux. Les séquences d'ADN de PLRV modifiées dans le cadre de la présente invention sont particulièrement utiles pour obtenir des plants de pomme de terre résistant aux infections de PLRV.
Hemenway Cynthia L.
Lawson Edgar C.
Tumer Nilgun E.
Weiss James D.
Mcfadden Fincham
Monsanto Company
LandOfFree
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