C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
N
C12N 15/86 (2006.01) C12N 15/861 (2006.01)
Patent
CA 2662150
A hybrid adenovirus Semliki Forest Virus (SFV) vector is provided which has a structure as shown in Figure 1, which may comprise 3' and 5' inverted terminal repeat (ITR) of adenovirus the packaging signal of adenovirus, the structural genes encoding the adenovirus hexon and penton proteins, fiber and knob proteins and which may be deleted in the E4 region, E2 region or in the both the E2 and E4 regions. The adenovirus vector may not require a helper virus coinfection for propagation in producer cell lines. The hybrid vector may comprise a eukaryotic promoter controlling expression of the 42S genome of SFV comprising the nonstructural genes 1-4 endowed with enhanced cytotoxicity after infection of target cells and retaining the ability to replicate the 42S genome, which also comprises the therapeutic mRNA, in the cytoplasm or the hybrid vector may comprise a eukaryotic promoter controlling expression of the 42S genome of SFV comprising the nonstructural genes 1-4 containing two point mutations. In use, the hybrid vector further comprises cDNA encoding for microRNA (miRNA) and hairpin loops of short interfering RNA (siRNA) or cDNA encoding for double-stranded RNA (dsRNA).
L'invention porte sur un vecteur hybride adénovirus-virus Semliki Forest ("Semliki Forest Virus" ou SFV) possédant une structure telle qu'illustrée à la figure 1, qui peut comprendre une séquence inversée répétée (" inverted terminal repeat" ou ITR) 3' et 5' de l'adénovirus, le signal d'encapsidation de l'adénovirus, les gènes structurels codant les protéines hexons et pentons de l'adénovirus, des protéines fibres et boutons, et qui peut présenter une délétion dans la région E4 et/ou dans la région E2. Le vecteur adénovirus peut ne pas nécessiter de co-infection par un virus assistant pour se propager dans les lignées cellulaires de production. Le vecteur hybride de l'invention peut comprendre un promoteur eucaryote qui régule l'expression du génome 42S du SFV comprenant les gènes non-structurels dotés d'une cytotoxicité augmentée après l'infection des cellules cibles et conservant la capacité de répliquer le génome 42S, et comprenant également l'ARNm thérapeutique dans le cytoplasme, ou bien le vecteur hybride peut comprendre un promoteur eucaryote qui régule l'expression du génome 42S du SFV comprenant les gènes non-structurels 1-4 contenant deux mutations ponctuelles. Lors de l'utilisation, le vecteur hybride comprend en outre un ADNc codant pour le microARN (ARNmi) et des boucles en épingle à cheveux d'ARN interférent court (ARNsi) ou un ADNc codant pour l'ARN double brin (ARNds).
Boulikas Parthenios
Roberts Michael
Borden Ladner Gervais Llp
Boulikas Parthenios
LandOfFree
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