G - Physics – 01 – N
Patent
G - Physics
01
N
G01N 33/68 (2006.01) G01N 33/50 (2006.01)
Patent
CA 2242851
The invention is a method for in vitro monitoring of peptide or protein fibril assembly. In order to provide sensitivity at nanomolar concentrations on the order of that observed in vivo, the method makes use of fluorescent energy transfer between closely juxtaposed donor and acceptor fluorophores. Accordingly, the invention requires attaching a donor fluorophore to a fibrillogenic peptide or protein, and attaching an acceptor fluorophore to a second fibrillogenic peptide or protein. The donor and acceptor fluorophores are located on the first and second peptides or proteins so that they are juxtaposed to permit energy transfer between them upon fibril formation. The fluorophore-containing peptides or proteins are mixed in solution at a normal physiological concentration, and fibril formation is monitored by observing the fluorescence energy transfer between the donor and acceptor fluorophores. Mixing is preferably done by providing equimolar amounts of peptides or proteins in a denaturant solution, and monitoring of fibril formation is initiated by diluting out the denaturant.
Méthode permettant de contrôler in vitro l'assemblage des fibrilles de peptide ou de protéine. Pour obtenir une sensibilité à des concentrations nanomolaires de l'ordre de celles observées in vivo, on recourt dans cette méthode à un transfert d'énergie de fluorescence entre des fluorophores donneur et receveur étroitement juxtaposés. Le procédé consiste à fixer un fluorophore donneur à un peptide ou une protéine fibrillogène, et fixer un fluorophore receveur à un deuxième peptide ou une deuxième protéine fibrillogène. Les fluorophores donneur et receveur sont situés sur les premier et second peptides ou protéines, et sont ainsi juxtaposés de façon à permettre le transfert d'énergie entre eux lors de la formation de fibrilles. Les peptides ou protéines contenant le fluorophore sont mélangés en solution à une concentration physiologique normale, et on suit la formation de fibrilles en observant le transfert d'énergie de fluorescence entre les fluorophores donneur et receveur. Le mélange est réalisé de préférence par l'apport en quantités équimolaires de peptides ou de protéines dans une solution dénaturante; on commence le contrôle de la formation de fibrilles en diluant le dénaturant.
Ridout & Maybee Llp
The Ontario Cancer Institute
LandOfFree
Protein fibril assembly assay does not yet have a rating. At this time, there are no reviews or comments for this patent.
If you have personal experience with Protein fibril assembly assay, we encourage you to share that experience with our LandOfFree.com community. Your opinion is very important and Protein fibril assembly assay will most certainly appreciate the feedback.
Profile ID: LFCA-PAI-O-1440905