Sandwich assay and kit

Details Sandwich assay and kit Sandwich assay and kit

G - Physics

01

N

G01N 33/543 (2006.01) G01N 33/68 (2006.01)

Patent

CA 2483408

A sandwich assay method for detecting the presence of a target molecule in a sample comprising a complex biological fluid is provided. The assay comprises providing a first affinity ligand with affinity for the target molecule, which affinity ligand is capable of being immobilized to a solid support; applying the sample in such a way that binding of a target molecule, if present in the sample, to the first affinity ligand is enabled; applying a second affinity ligand with affinity for the target molecule, the application enabling binding of the second affinity ligand to the target molecule; removing second affinity ligand not bound to target molecule; and detecting the presence of the second affinity ligand, such presence being an indicator of the presence of a target molecule in the sample. The first affinity ligand is immobilized to the solid support at any stage before said detection, and at least one of the first and second affinity ligands is an affinity ligand other than an antibody. The invention also provides a kit for use in the method. The kit comprises: a first affinity ligand with affinity for the target molecule and capable of being immobilized to a slid support; a second affinity ligand with affinity for the target molecule, the presence of which ligand is detectable; and a solid support to which the first affinity ligand is capable of being immobilized. In he kit, at least one of the first and second affinity ligands is an affinity ligand other than an antibody.

Cette invention se rapporte à un procédé de dosage en sandwich servant à détecter la présence d'une molécule cible dans un échantillon comprenant un fluide biologique complexe. Ce procédé de dosage consiste à produire un premier ligand d'affinité pour la molécule cible et capable de s'immobiliser sur un support solide; à appliquer cet échantillon de façon à permettre la fixation d'une molécule cible, si elle est présente dans l'échantillon, au premier ligand d'affinité, à appliquer un second ligand d'affinité avec affinité pour la molécule cible, cette application permettant la fixation du second ligand d'affinité à la molécule cible; à retirer le second ligand d'affinité qui ne s'est pas fixé à la molécule cible; et à détecter la présence du second ligand d'affinité, cette présence indiquant la présence d'une molécule cible dans l'échantillon. Le premier ligand d'affinité est immobilisé sur le support solide à n'importe quel stade avant la détection et le premier et/ou le second ligand d'affinité est un ligand d'affinité autre qu'un anticorps. Cette invention concerne également un kit à utiliser dans ce procédé. Ce kit comprend: un premier ligand d'affinité avec affinité pour la molécule cible et capable de s'immobiliser sur un support solide; un second ligand d'affinité avec affinité pour la molécule cible, et dont la présence est détectable; et un support solide sur lequel le premier ligand d'affinité est capable de s'immobiliser. Dans ce kit, le premier et/ou le second ligand d'affinité est un ligand d'affinité autre qu'un anticorps.

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