Novel formate dehydrogenase tolerant to halogen compounds...

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N

Patent

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Details

C12N 15/53 (2006.01) C12N 1/21 (2006.01) C12N 9/02 (2006.01) C12N 9/04 (2006.01) C12P 21/02 (2006.01)

Patent

CA 2461266

It is intended to provide a formate dehydrogenase which has a high specific activity, a small Km values to formic acid and NAD, a temperature-stability over a wide range, a pH-stability over a wide range, a wide function temperature range and a wide function pH range, is not inactivated even in case of coexisting in an enzymatic reduction system of a haloketone compound, and can efficiently regenerate a coenzyme. A formate dehydrogenase-producing strain is searched for from soil and an enzyme having the above-described properties and suitable for industrial use is provided. Moreover, a DNA containing the gene of this enzyme, a recombinant DNA with a vector and its transformant constructed by using a plasmid are provided. Furthermore, a process for producing the formate dehydrogenase using a strain belonging to the genus Thiobacillus or a transformant constructed by using a formate dehydrogenase gene originating in this strain, and a method of regenerating a coenzyme in an enzymatic reduction system with the use of this enzyme are provided.

Cette invention concerne une formiate déshydrogénase présentant une activité spécifique élevée, une faible valeur Km pour l'acide formique et la NAD, une stabilité sur une gamme étendue de température, une stabilité sur une gamme étendue de pH, une activité sur une vaste étendue de température et une vaste étendue de pH, laquelle formiate déshydrogénase n'est pas inactivée, même en cas de coexistence dans un système de réduction enzymatique d'un composé halocétone, et peut régénérer une coenzyme de manière efficace. Une souche produisant cette formiate déshydrogénase est recherchée dans le sol, et une enzyme présentant les propriétés susmentionnées et convenant à une application industrielle est obtenue. En outre, un ADN contenant le gène de cette enzyme, un ADN recombiné avec un vecteur et son transformant élaboré à l'aide d'un plasmide sont obtenus. De plus, cette invention concerne un procédé de production de formiate déshydrogénase à l'aide d'une souche appartenant au genre Thiobacillus ou d'un transformant obtenu au moyen d'un gène de formiate déshydrogénase provenant de cette souche, ainsi qu'un procédé de régénération d'une coenzyme dans un système de réduction enzymatique faisant appel à cette enzyme.

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