C - Chemistry – Metallurgy – 07 – H
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
07
H
C07H 1/06 (2006.01) B01J 41/04 (2006.01) C07C 37/82 (2006.01) C07C 51/47 (2006.01) C07C 55/14 (2006.01) C07C 63/26 (2006.01) C07C 201/16 (2006.01) C12N 15/10 (2006.01) C12Q 1/68 (2006.01)
Patent
CA 2300885
The invention relates to a method for isolating anionic organic substances from aqueous systems using polymer nanoparticles with cationic pH-sensitive surface groups. Extraction can be carried out directly from diluted solutions, biological media (blood plasma, serum, urine, etc.) and complex buffer systems (e.g. PCR preparations containing detergents) without prior derivatization of the samples or addition of binding buffers. After separation from the surrounding medium the conjugates of the corresponding substances and polymer nanoparticles obtained in this manner can be purified through additional washing steps and effectively desalinated. Owing to the pH-sensitivity of the basic surface groups, the bound substances can be released in a targeted manner after separation by modification of the pH of the medium. By using volatile bases contamination of the released samples with ionic residues can be avoided. By adding small quantities of SDS and acetonitrile during the separation stage, the sensitivity of the method can be raised further, especially when the substances to be isolated are present in low concentrations (<1µmol/L). The method is a method of extraction with universal application, suitable for both low-molecular anionic compounds as well as peptides, nucleic acids and nucleic acid derivatives. Recovery rates are up to 100 %.
L'invention concerne un procédé qui permet d'isoler des substances organiques anioniques à partir de systèmes aqueux au moyen de nanoparticules polymères comportant des groupes de surface cationiques sensibles au pH. L'extraction peut se faire directement à partir de solutions diluées et de milieux biologiques (plasma sanguin, sérum, urine, etc.), ainsi que de systèmes tampons complexes (préparations pour PCR contenant des détergents, par exemple), sans qu'il soit nécessaire ni de dérivatiser préalablement les échantillons, ni d'ajouter des tampons de liaison. Les conjugués des substances correspondantes avec les nanoparticules polymères ainsi obtenus peuvent, après leur séparation du milieu environnant, être purifiés par des étapes de lavage supplémentaires et débarrassés de leurs sels. De par la sensibilité au pH des groupes de surface basiques il est possible, après séparation, de libérer de façon ciblée les substances liées en modifiant le pH du milieu. L'utilisation de bases facilement volatiles permet d'éviter une contamination des échantillons libérés par des résidus ioniques. L'ajout de petites quantités de SDS et d'acétonitrile à l'étape de séparation peut, notamment en cas de faible concentration des substances à isoler (<1µmol/l), augmenter encore la sensibilité du procédé. Celui-ci représente une technique d'extraction universelle convenant aussi bien aux composés anioniques de faible poids moléculaire qu'aux peptides, aux acides nucléiques et aux dérivés de ces derniers. Le taux de récupération peut atteindre 100 %.
Bayer Ernst
Fritz Hans
Gerster Michael
Maier Martin
Schewitz Jens
Degussa Ag
Gowling Lafleur Henderson Llp
Skw Trostberg Aktiengesellschaft
LandOfFree
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Profile ID: LFCA-PAI-O-1480780