A - Human Necessities – 61 – K
Patent
A - Human Necessities
61
K
A61K 35/32 (2006.01)
Patent
CA 2535169
The present invention provides methods of improving the osteogenic and/or chondrogenic activity of a bone matrix, e.g., a dermineralized bone matrix (DBM), by exposing the bone matrix to one or more treatments or conditions. In preferred embodiments the bone matrix is derived from human bone. The treatment or condition may alter the structure of the bone matrix and/or cleave one or more specific proteins. Cleavage may generate peptides or protein fragments that have osteoinductive, osteogenic, or chondrogenic activity. Preferred treatments include collagenase and various other proteases. The invention further provides improved bone and cartilage matrix compositions that have been prepared according to the inventive methods and methods of treatment using the compositions. The invention further provides methods of preparing, testing, and using the improved bone matrix compositions. Ona assay comprises exposing relatively undifferentiated mesenchymal cells to a bone matrix composition and measuring expression of a marker characteristic of osteoblast or chondrocyte lineage(s). Increased expression of the marker relative to the level of the marker in cells that have been exposed to a control matrix (e.g., an inactivated or untreated matrix) indicates that the treatment or condition increased the osteogenic and/or chondrogenic activity of the bone matrix. Suitable cells include C2C12 cells. A suitable marker is alkaline phosphatase. The inventive methods increase the osteogenic and/or chondrogenic activity of human DBM when tested using this assay system.
La présente invention concerne des méthodes permettant d'améliorer l'activité ostéogénique et/ou chondrogénique d'une matrice osseuse, par exemple, d'une matrice osseuse déminéralisée (DBM), suite à une exposition de ladite matrice osseuse à au moins un traitement ou une condition. Dans des modes de réalisation préférés, la matrice osseuse provient d'os humain. Le traitement ou la condition peut modifier la structure de la matrice osseuse et/ou cliver au moins une protéine spécifique. Le clivage peut engendrer des peptides ou des fragments protéiques qui possèdent une activité ostéo-inductrice, ostéogénique ou chondrogénique. Des traitements préférés comprennent la collagénase et diverses autres protéases. Cette invention a également pour objet des compositions améliorées de matrice cartilagineuse et osseuse qui ont été préparées selon les méthodes de cette invention, et des méthodes de traitement utilisant lesdites compositions. Ladite invention a aussi trait à des méthodes de préparation, d'essai et d'utilisation des compositions de matrice osseuse améliorées. Un dosage consiste à exposer des cellules mésenchymateuses relativement indifférenciées à une composition de matrice osseuse et à mesurer l'expression d'un marqueur caractéristique d'une lignée d'ostéoblaste ou de chondrocyte. Une expression accrue du marqueur par rapport au niveau du marqueur dans des cellules qui ont été exposées à une matrice témoin (par exemple, une matrice inactivée ou non traitée) indique que le traitement ou la condition a accru l'activité ostéogénique et/ou chondrogénique de la matrice osseuse. Des cellules appropriées comprennent des cellules C2C12. Un marqueur adéquat est la phosphatase alcaline. Ces méthodes servent à augmenter l'activité ostéogénique et/ou chondrogénique de la matrice osseuse déminéralisée humaine, lorsqu'elle est testée au moyen de ce système de dosage.
Behnam Keyvan
Cioffi Christopher
Osteotech Inc.
Smart & Biggar
Warsaw Orthopedic Inc.
LandOfFree
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