C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
N
C12N 15/11 (2006.01) C07H 21/04 (2006.01) C12Q 1/68 (2006.01)
Patent
CA 2194958
A method of discriminating individual organisms which comprises conducting a polymerase chain reaction using DNA fragments of test individuals and a primer having a symmetrical base sequence, separating the amplified DNA fragments by polyacrylamide gel electrophoresis, staining each of the separated DNA fragments by silver staining, and comparing the stained DNA fragments with each other; the above method of discrimination wherein the primer having a symmetrical base sequence is one member selected among the following ones: 5'- CCCTAAAGAAATCCC-3', 5'-TTTAGGGCGGGATTT-3', 5'-AGGGCCTTCCGGGA-3'; and the above method of discrimination wherein the individual organisms are animal or plant individuals. The method of the invention enables individual discrimination to be performed efficiently on the basis of a difference in DNA sequence, because it is possible to clearly ascertain different DNA fragments exhibiting polymorphism among test individuals. It is also possible to clearly ascertain different DNA fragments exhibiting polymorphism among test individuals by appropriately regulating the temperature condition of the polymerase chain reaction. Further it is possible to observe more clearly the DNA fragments exhibiting polymorphism among test individuals.
L'invention porte sur un procédé de discrimination de différents organismes consistant à exécuter une PCR sur des fragments d'ADN d'individus à tester, et une amorce présentant une séquence de base symétrique, puis à séparer les fragments d'ADN amplifiés par électrophorèse sur gel de polyacrylamide, puis à marquer à l'argent chacun des fragments séparés d'ADN, et à comparer entre eux les fragments d'ADN marqués. L'invention porte également sur le susdit procédé dans lequel l'amorce à séquence de base symétrique est l'une des suivantes: 5'-CCCTAAAGAAATCCC-3', 5'-TTTAGGGCGGGATTT3', 5'-AGGGCCTTCCGGGA-3', et dans lequel les organismes individuels sont des animaux ou des plantes. Le procédé objet de l'invention présente une bonne efficacité de discrimination fondée sur une différence de séquence d'ADN car il permet d'identifier avec certitude ceux des fragments d'ADN des individus à tester dotés de polymorphisme notamment en réglant idoinement les conditions de température de la PCR. Il permet enfin une meilleure observation des fragments d'ADN dotés de polymorphisme chez les individus à tester.
Forage Crop Breeding And Seed Research Institute
Ogilvy Renault
LandOfFree
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Profile ID: LFCA-PAI-O-1495898