Linker-assisted immunoassay for glyphosate

C - Chemistry – Metallurgy – 07 – K

Patent

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Details

C07K 16/44 (2006.01) G01N 33/18 (2006.01) G01N 33/24 (2006.01) G01N 33/53 (2006.01) G01N 33/531 (2006.01) G01N 33/543 (2006.01) G01N 33/577 (2006.01)

Patent

CA 2347054

This invention provides a simple, inexpensive and high throughput assay method for the widely used herbicide, glyphosate, as an alternative to the currently used complex analytical methods. The invention provides a number of immunological reagents suitable for use in an immunoassay for glyphosate. The reagents include: (i) immunogens prepared by covalently linking glyphosate or glyphosine to a suitable carrier protein such as porcine thyroglobulin (TG) via the carbodiimide reaction, (ii) a phase coating conjugate prepared by covalently linking glyphosate to a suitable carrier protein such as BSA and (iii) antibodies to the above-mentioned immunogens. The invention also provides an immunoassay method with enhanced sensitivity (ppb level) for the analysis of glyphosate in environmental or biological samples. Methods for protein-hapten conjugate preparation, anti-glyphosate antibody production, and pre-assay derivatization of samples applicable to a variety of immunoassay formats are also provided.

L'invention concerne un procédé de dosage simple, bon marché, et à débit élevé, destiné à un herbicide largement utilisé, le glyphosate, en tant que procédé de remplacement des méthodes analytiques complexes actuelles. L'invention concerne également un certain nombre de réactifs immunologiques conçus pour être utilisés dans un immunodosage du glyphosate. Ces réactifs comprennent: (i) de s immunogènes préparés par liaison covalente du glyphosate ou de la glyphosine avec une protéine véhicule appropriée, telle qu'une thyroglobuline porcine, au moyen d'une réaction carbodiimide, (ii) un conjugué de revêtement en phase solide, préparé par liaison covalente du glyphosate avec une protéine véhicule appropriée, telle que l'albumine sérique bovine, et (iii) des anticorps dirigés contre les immunogènes ci-dessus mentionnés. L'invention concerne également une méthode d'immunodosage à sensibilité accrue (domaine p.p.b.), destinée à l'analyse du glyphosate dans des échantillons de l'environnement ou biologiques; elle concerne encore de s procédés de préparation de conjugués protéines/haptènes, de production d'anticorps dirigés contre le glyphosate, et avant dosage, de dérivatisation d'échantillons, applicable à plusieurs formats d'immunodosage.

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