Nucleic acid detection method

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – Q

Patent

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C12Q 1/68 (2006.01) C12P 19/34 (2006.01) C12Q 1/04 (2006.01) C12Q 1/48 (2006.01)

Patent

CA 2448211

A method for detecting the presence of a target nucleic acid sequence in a sample, said method comprising: performing nucleic acid amplification on the sample in the presence of (a) a DNA duplex binding agent, (b) a nucleic acid polymerase and (c) a reagent comprising an amplification primer which can hybridise to said target sequence when in single stranded form and which is connected at its 5' end to a probe which carries a label by way of a chemical linking group, said labelled probe being of a sequence which is similar to that of the said target nucleic acid sequence, such that it can hybridise to a complementary region in an amplification product, and wherein the label is able to absorb fluorescence from or donate fluorescent energy to the DNA duplex binding agent; and monitoring fluorescence of said sample.

L'invention concerne un procédé permettant de détecter la présence d'une séquence d'acide nucléique cible dans un échantillon. Ledit procédé consiste à effectuer une amplification d'acide nucléique sur l'échantillon en présence (a) d'un agent de liaison double à l'ADN, (b) d'une polymérase à l'acide nucléique et (c) d'un réactif comprenant une amorce d'amplification qui peut s'hybrider avec ladite séquence cible lorsqu'elle se présente sous la forme à simple brin et qui est liée, au niveau de sa terminaison 5', à une sonde qui comporte une étiquette au moyen d'un groupe de liaison chimique. Ladite sonde étiquetée provient d'une séquence semblable à celle de ladite séquence cible, ce qui lui permet de s'hybrider avec une région complémentaire dans un produit d'amplification, l'étiquette pouvant absorber la fluorescence de l'agent de liaison double à l'ADN ou lui en donner; et de surveiller la fluorescence dudit échantillon.

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