C - Chemistry – Metallurgy – 12 – Q
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
Q
C12Q 1/68 (2006.01) C12P 19/34 (2006.01) G01N 33/53 (2006.01)
Patent
CA 2195480
A nucleotide sequence amplification method wherein a polynucleotide containing the sequence is contacted with oligonucleotide primers, nucleoside triphosphates and/or deoxynucleoside triphosphates containing the various purine and pyrimidine bases needed to synthesise the amplification product, and an enzyme system having DNA polymerase and/or RNA polymerase and/or reverse transcriptase activity, under conditions enabling the sequence of interest to be amplified in a per se known manner. One of the nucleoside triphosphates and/or deoxynucleoside triphosphates is present either in a modified form or in both a modified form and an unmodified form, and, in said modified form, the purine or pyrimidine base is substituted by at least one methyl, hydroxymethyl or acetyl grouping.
Procédé d'amplification d'une séquence nucléotidique, dans lequel on met en contact un polynucléotide contenant ladite séquence, des amorces oligonucléotidiques, les nucléosides triphosphates et/ou désoxynucléosides triphosphates contenant les diverses bases puriques et pyrimidiques nécessaires à la synthèse du produit d'amplification, et un système enzymatique ayant une activité de DNA polymérase et/ou de RNA polymérase et/ou de transcriptase inverse, dans des conditions permettant d'effectuer, de façon connue en soi, une amplification de ladite séquence d'intérêt, caractérisé par le fait que l'un desdits nucléosides triphosphates et/ou désoxynucléosides triphosphates est présent soit sous une forme modifiée, soit à la fois sous une forme modifiée et sous une forme non modifiée, et que, dans ladite forme modifiée, la base pyrimidique ou purique est substituée par au moins un groupement méthyle, hydroxyméthyle ou acétyle.
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Robic
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