C - Chemistry – Metallurgy – 12 – Q
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
Q
C12Q 1/68 (2006.01)
Patent
CA 2630573
The present invention provides a method for amplifying a pool of polynucleotide molecules in a sample, characterized by the steps of a) obtaining a sample or RNA and reverse transcription of entire RNA molecules thus creating full length cDNA or obtaining a sample of full length cDNA, b) tailing the 3' end of the transcribed cDNA with a polynucleotide tail after the 3' end, c) amplification of the cDNA using a pair of primers, wherein a first (3') primer is specific for the 5' end of the cDNA and a second (51) primer is specific for the a upstream portion of the polynucleotide tail and the next 1 to 10 nucleotides upstream of the 3' polynucleotide tail of the cDNA.
La présente invention concerne un procédé servant à amplifier un ensemble de molécules de type polynucléotides présentes dans un échantillon, caractérisé par les étapes consistant à : a) obtenir un échantillon d'ARN et effectuer la transcription inverse des molécules d'ARN entières créant ainsi un ADNc pleine longueur ou obtenir un échantillon d'ADNc pleine longueur ; b) effectuer une extension homopolymérique sur l'extrémité 3' de l'ADNc transcrit avec une extension de type polynucléotide après l'extrémité 3' ; c) amplifier l'ADNc en utilisant une paire d'amorces, une première amorce (3') étant spécifique pour l'extrémité 5' de l'ADNc et une seconde amorce (5') étant spécifique pour une portion en amont de l'extension de type polynucléotide et les 1 à 10 nucléotides suivants en amont de l'extension de type polynucléotide en 3' de l'ADNc.
Bereskin & Parr Llp/s.e.n.c.r.l.,s.r.l.
Lexogen Gmbh
LandOfFree
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Profile ID: LFCA-PAI-O-1525130