Microbiological test method and reagents

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – Q

Patent

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C12Q 1/48 (2006.01) C12Q 1/04 (2006.01) C12Q 1/06 (2006.01) C12Q 1/66 (2006.01)

Patent

CA 2194457

A method for determining the presence and/or amount of microorganisms and/or their intracellular material present in a sample comprising estimating the amount of adenylate kinase therein by its ability to convert adenosine diphosphate (ADP) to adenosine triphosphate (ATP) in the presence of added magnesium ions and relating that to the presence/or amount or organism and/or intracellular material. The method provides improved sensitivity over existing luciferase/luciferin assays. Reagents including purified ADP and adenylate kinase free luciferase are provided together with test kits including these and apparatus for automated operation of the method.

L'invention concerne un procédé de détermination de la présence et/ou de la quantité de micro-organismes et/ou de leur substance intracellulaire présente dans un échantillon. Le procédé consiste à estimer la quantité d'adénylate-kinase présente dans l'échantillon grâce à son pouvoir de conversion de l'adénosine diphosphate (ADP) en adénosine triphosphate (ATP) en présence d'ions magnésium ajoutés et à en déduire la présence et/ou la quantité d'un organisme et/ou de substances intracellulaires. Le procédé permet d'obtenir une sensibilité accrue par rapport à des analyses de luciférase/luciférine. L'invention a recours à des réactifs incluant l'ADP purifié et de la luciférase exempte d'adénylate-kinase, ainsi qu'à des trousses d'analyse comprenant ces réactifs ainsi qu'un appareil permettant la mise en oeuvre automatisée du procédé.

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