Methods of inducing the expression of bone morphogenetic...

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – P

Patent

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C12P 21/02 (2006.01) C07K 14/475 (2006.01) C07K 14/51 (2006.01)

Patent

CA 2518295

A method of inducing the expression of one or more bone morphogenetic proteins and/or transforming growth factor-.beta. proteins in a cell is described. The method includes transfecting a cell with an isolated nucleic acid comprising a nucleotide sequence encoding a LIM mineralization protein operably linked to a promoter. The one or more bone morphogenetic proteins can be BMP-2, BMP-4, BMP- 6, BMP-7 or combinations thereof. The transforming growth factor-.beta. protein can be transforming growth factor- .beta.1 protein (TGF- .beta.1). Transfection may be accomplished ex vivo or in vivo by direct injection of virus or naked DNA, or by a nonviral vector such as a plasmid. The method can be used to induce bone formation in osseous cells or to stimulate proteoglycan and/or collagen production in cells capable of producing proteoglycyan and/or collagen (e.g., intervertebral disc cells).

L'invention concerne une méthode d'induction de l'expression d'une ou de plusieurs protéines morphogénétiques osseuses et/ou de protéines de facteur .beta. de croissance et de transformation, dans une cellule. Cette méthode consiste à transfecter une cellule à l'aide d'un acide nucléique isolé comprenant une séquence nucléotidique codant une protéine de minéralisation LIM reliée de manière fonctionnelle à un promoteur. La protéine morphogénétique osseuse peut être: BMP-2, BMP-4, BMP-6, BMP-7 ou des combinaisons de celle-ci. La protéine de facteur .beta. de croissance et de transformation peut être une protéine de facteur .beta.1 de croissance et de transformation (TGF-.beta.1). La transfection peut s'accomplir <i>ex vivo </i>ou<i> in vivo</i> par injection directe d'un virus ou d'un ADN nu, ou par un vecteur non viral, notamment un plasmide. Cette méthode peut être utilisée pour induire une formation osseuse dans des cellules osseuses ou pour stimuler une production de protéoglycane et/ou de collagène dans des cellules permettant de produire du protéoglycane et/ou du collagène (par exemple, des cellules de disques intervertébraux).

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