C - Chemistry – Metallurgy – 07 – K
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
07
K
C07K 14/505 (2006.01)
Patent
CA 2736141
In the present invention a method for purifying erythropoietin comprising at least one chromatography step using a stationary phase containing hydroxyapatite is reported. The method comprises the following steps i) the erythropoietin in a solution containing Calcium-ions is brought into contact with a stationary phase containing hydroxyapatite equilibrated with a solution containing Calcium-ions and namely under conditions under which the erythropoietin binds to the stationary phase containing hydroxyapatite, ii) a solution is passed over the stationary phase containing hydroxyapatite from i) which contains less Calcium- ions than the previous solution and the erythropoietin is not detached from stationary phase containing hydroxyapatite, and iii) a further solution which contains less than 0.5 mM Calcium-ions is passed over the stationary phase containing hydroxyapatite from ii) whereby the erythropoietin is detached from the stationary phase containing hydroxyapatite.
La présente invention concerne un procédé de purification de l'érythropoïétine comprenant au moins une étape chromatographique utilisant une phase stationnaire contenant de l'hydroxyapatite. Le procédé comprend les étapes suivantes : i) l'érythropoïétine dans une solution contenant des ions calcium est mise en contact avec une phase stationnaire contenant de l'hydroxyapatite équilibrée avec une solution contenant des ions calcium et, à savoir, dans des conditions dans lesquelles l'érythropoïétine se lie à la phase stationnaire contenant l'hydroxyapatite, ii) une solution est mise en circulation sur la phase stationnaire contenant l'hydroxyapatite de l'étape i) qui contient moins d'ions calcium que la solution précédente et l'érythropoïétine n'est pas détachée de la phase stationnaire contenant l'hydroxyapatite, et iii) une autre solution qui contient moins de 0,5 mM d'ions calcium est mise en circulation sur la phase stationnaire contenant l'hydroxyapatite de l'étape ii), l'érythropoïétine étant détachée de la phase stationnaire contenant l'hydroxyapatite.
Schmalz Christian
Schmelzer Antje
F. Hoffmann-La Roche Ag
Gowling Lafleur Henderson Llp
LandOfFree
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Profile ID: LFCA-PAI-O-1571048