C - Chemistry – Metallurgy – 12 – Q
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
Q
C12Q 1/02 (2006.01) C12N 5/071 (2010.01) A01K 67/00 (2006.01) A01K 67/027 (2006.01) C07C 251/02 (2006.01) C07D 213/53 (2006.01) C07D 239/60 (2006.01) C07D 307/14 (2006.01) C07F 5/02 (2006.01) C07F 9/09 (2006.01) C12Q 1/00 (2006.01) G01N 21/64 (2006.01) G01N 33/50 (2006.01) G01N 33/52 (2006.01) G01N 33/58 (2006.01) G01N 33/92 (2006.01) C09B 23/02 (2006.01) C09K 11/06 (2006.01) C12N 13/00 (2006.01)
Patent
CA 2393562
Methods and compositions are provided for detecting changes in membrane potential in membranes biological systems. In one aspect, the method comprises: a) providing a living cell with a first reagent comprising a charged hydrophobic molecule which is typically a fluorescence resonance energy transfer (FRET) acceptor or donor, or is a quencher and is capable of redistributing within the membrane of a biological membrane in response to changes in the potential across the membrane; b) providing the cell with a second reagent that can label the first face or the second face of a biological membrane within the cell; c) detecting light emission from the first reagent or the second reagent. One aspect of this method involves monitoring membrane potential changes in subcellular organelle membranes in a living cell. Another aspect of the invention is the use of certain embodiments of the method for the screening of test chemicals for activity to modulate the activity of a target ion channel. Another aspect of the present invention is a transgenic organism comprising a first reagent that comprises a charged hydrophobic fluorescent molecule, and a second reagent comprising a bioluminescent or naturally fluorescent protein.
L'invention concerne des procédés et des compositions pour détecter des changements du potentiel membranaire dans les systèmes biologiques à membranes. Dans un aspect, le procédé consiste en ce qui suit: a) confronter une cellule vivante avec un réactif comprenant une molécule hydrophobe chargée qui est, d'une manière générale, un accepteur ou un donneur de transfert d'énergie par résonance à fluorescence (FRET) ou un extincteur et qui est capable de redistribution à l'intérieur d'une membrane biologique en réponse aux changements de potentiel à travers la membrane b) confronter la cellule avec un deuxième réactif qui peut étiqueter la première ou la seconde faces d'une membrane biologique à l'intérieur de la cellule; c) détecter l'émission lumineuse à partir du premier réactif ou de la membrane intracellulaire et d) détecter l'émission lumineuse du premier ou du second réactifs. Dans l'un des aspects, le procédé consiste à surveiller les changements du potentiel de membrane dans les membranes d'organites sous-cellulaires dans une cellule vivante. Dans un autre aspect, il s'agit d'utiliser certains modes de réalisation de ce procédé pour cribler des médicaments de test afin de vérifier leur capacité de moduler l'activité d'un canal ionique cible. Dans un troisième aspect, l'invention concerne un organisme transgénique comprenant un premier réactif qui comprend des molécules fluorescentes hydrophobes chargées et un deuxième réactif comprenant une protéine bioluminescente ou naturellement fluorescente.
Gonzalez Jesus E. III
Tsien Roger Y.
Mbm Intellectual Property Law Llp
Regents Of The University Of California
LandOfFree
Detection of transmembrane potentials by optical methods does not yet have a rating. At this time, there are no reviews or comments for this patent.
If you have personal experience with Detection of transmembrane potentials by optical methods, we encourage you to share that experience with our LandOfFree.com community. Your opinion is very important and Detection of transmembrane potentials by optical methods will most certainly appreciate the feedback.
Profile ID: LFCA-PAI-O-1571166