C - Chemistry – Metallurgy – 12 – Q
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
Q
C12Q 1/68 (2006.01)
Patent
CA 2388561
The invention relates to a method for the controlled implementation of complex PCR amplifications, which comprises at least the following steps: a) PCR amplification using at least 50 primers of a first type (type 1) which have different sequences and complement an arbitrary strand of a DNA sample, said amplification containing a primer or a primer library of a second type (type 2), which complements the other strand of the DNA sample used, the primers of type 2 having a first label (label 1), b) Hybridisation of the amplificates to an oligomer array which contains oligonucleotides, the latter hybridising to the primers used in the PCR reaction, or to oligonucleotides which complement said primers; or hybridisation of the amplificates to an oligomer array, which contains oligomers that complement the primers used in the PCR reaction; c) Determination of the length of the amplificates that are bound to the array using a second label (label 2) which is different from the first label (label 1) in step a) and can be correlated with the length of the respective DNA fragment and d) Quantification of the signals emanating from label 1 and label 2 at each point on the oligonucleotide array that is relevant to the analysis.
L'invention concerne un procédé pour la réalisation contrôlable d'amplifications par PCR complexes comprenant au moins les étapes suivantes : a) amplification par PCR avec au moins 50 amorces d'un premier type (type 1) de séquence différente et complémentaires d'un brin d'un échantillon d'ADN quelconque, ladite amplification se faisant en outre avec une amorce ou une bibliothèque d'amorces d'un deuxième type (type 2), complémentaire de l'autre brin de l'échantillon d'ADN utilisé, sachant que les amorces du type 2 ont un premier marquage (marquage 1) ; b) hybridation des éléments amplifiés sur un réseau oligomère comprenant des oligonucléotides qui s'hybrident avec les amorces utilisées dans la réaction PCR ou avec les oligonucléotides complémentaires desdites amorces; ou hybridation des éléments amplifiés sur un réseau oligomère comprenant des oligomères complémentaires des amorces utilisées dans la réaction PCR; c) détermination de la longueur des éléments amplifiés liés au réseau, grâce à un deuxième marquage (marquage 2) qui peut être mis en corrélation avec la longueur du fragment d'ADN respectif et se différencie du premier marquage (marquage 1) de l'étape a), et d) quantification des signaux émanant des marquages 1 et 2 à chaque point du réseau d'oligonucléotides représentant un intérêt pour l'analyse.
Epigenomics Ag
Macrae & Co.
LandOfFree
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Profile ID: LFCA-PAI-O-1591182