C - Chemistry – Metallurgy – 12 – Q
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
Q
C12Q 1/06 (2006.01)
Patent
CA 2584470
The invention concerns the use of bioluminescence dependent on the reaction (1): luciferin + ATP + O2 + Mg2+ + luciferase -> oxyluciferin + photons for detecting and counting living cells of a given species potentially present in a liquid sample, said use being characterized in that it consists in measuring the total free intracellular adenyl nucleotides (AN) content, expressed in ATP form, of living cells of a given non-viral species, taking into account the fact that the sum of free intracellular ATP, ADP and AMP of said family is constant according to the relationship (2): [AN] = [ATP] + [ADP] + [AMP] = Cte after transforming the free intracellular ATP, ADP and AMP by using myokinase and pyruvate kinase, said measurement being performed (i) without adding ATP and (ii) after adding a known amount of ATP. The invention also concerns a method for detecting and counting cells by ATP-metry.
La présente invention a trait à l'utilisation de la bioluminescence selon la réaction (1) : (1) luciférine + ATP + O2 + Mg2+ + luciférase -> oxyluciférine + photons pour détecter et dénombrer les cellules vivantes d'une espèce donnée pouvant être présentes dans un échantillon liquide, ladite utilisation étant caractérisée en ce qu'elle met en AEuvre la mesure de la teneur en nucléotides adényliques (AN) intracellulaires libres totaux, exprimée sous forme d'ATP, de cellules vivantes d'une espèce non virale donnée, en tenant compte du fait que la somme des ATP, ADP et AMP intracellulaires libres de ladite famille est constante selon la relation (2) : (2) [AN] = [ATP] + [ADP] + [AMP] = Cte après avoir transformé les ADP et AMP intracellulaires libres en ATP au moyen de myokinase et de pyruvate kinase, ladite mesure étant réalisée (i) sans ajout d'ATP et (ii) après ajout d'une quantité connue d'ATP. Elle concerne également un procédé pour détecter et dénombrer les cellules par ATP-métrie.
Norton Rose Or S.e.n.c.r.l. S.r.l./llp
Testlife Technologies
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Profile ID: LFCA-PAI-O-1603658