G - Physics – 01 – N
Patent
G - Physics
01
N
G01N 33/536 (2006.01) C07H 21/02 (2006.01) C07H 21/04 (2006.01) C12N 15/00 (2006.01) C12Q 1/48 (2006.01) C12Q 1/68 (2006.01) G01N 33/543 (2006.01)
Patent
CA 2437753
Fusion proteins in which glutathione S-transferase (GST) is a fusion partner are used as an immobilized binding member in screening procedures or other multi-analyte test procedures based on protein interaction. In such procedures, a particular protein is selected from a group of candidate proteins on the basis of the binding affinity of that protein for a target protein, with either the candidate proteins or the target protein being a fusion partner with GST and the GST portion of the fusion partner having been immobilized on glutathione-coated particles by the binding of GST to glutathione. The particles themselves are classifiable by different values of a differentiation parameter that permits them to be distinguished by flow cytometry, and the procedure is conducted in a manner that associates the individual candidate proteins with individual classes of the particles. When a binding interaction occurs between a candidate protein and the target protein, the particles on which the interaction has occurred are readily distinguished by flow cytometry and correlated with the candidate protein that exhibited the binding.
L'invention concerne des protéines hybrides dans lesquelles la glutathione S-transférase (GST) est un partenaire de fusion, utilisées comme élément de liaison immobilisé dans des méthodes de sélection ou d'autres méthodes d'essai à analytes multiples reposant sur l'interaction entre des protéines. Dans ces méthodes, une protéine est sélectionnée dans un groupe de protéines d'intérêt sur la base de l'affinité de liaison de cette protéine pour une protéine cible, les protéines d'intérêt ou la protéine cible étant un partenaire de fusion avec la GST et la partie de la GST du partenaire de fusion ayant été immobilisée sur des particules induites à l'aide de glutathione par la liaison de la GST avec le glutathione. Ces particules peuvent être classées à l'aide de différentes valeurs d'un paramètre de différentiation permettant de les distinguer par cytométrie de flux et la méthode est dirigée de façon à associer les protéines d'intérêt individuelles avec des classes individuelles des particules. Lorsqu'une interaction de liaison se produit entre une protéine d'intérêt et la protéine cible, les particules sur lesquelles l'interaction s'est produite sont faciles à distinguer par cytométrie de flux et peuvent être corrélées avec la protéine d'intérêt qui présentait la liaison.
Nguyen Quan
Song Yong
Bio-Rad Laboratories Inc.
Fetherstonhaugh & Co.
LandOfFree
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