Method for detecting hybridization events in nucleic acids

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – Q

Patent

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C12Q 1/68 (2006.01) C12Q 1/44 (2006.01)

Patent

CA 2468411

Disclosed is a method for detecting target nucleic acid by hybridization, wherein a) hybridization is carried out with at least one probe nucleic acid which is bound with one end to a solid phase, whereby the probe nucleic acid comprises the target nucleic acid sequence or a complementary sequence thereto, which is flanked on the 3' end of a short nucleic acid sequence and on the 5' end of a nucleic acid sequence which is complementary to said nucleic acid sequence, forming a DNA double strand and a cleavage module which can be cleaved by a double-strand-specific nuclease and the probe nucleic acid has a marker on the other end thereof, b) at least one treatment with at least one dual-strand-specific nuclease is performed and c) the amount of the marker is determined, said marker being bound to the solid phase according to step b).

La présente invention concerne un procédé pour mettre en évidence des acides nucléiques par hybridation, ledit procédé comprenant les étapes suivantes: a) hybridation avec au moins un acide nucléique sonde qui est lié à une extrémité à une phase solide, l'acide nucléique sonde présentant la séquence d'acide nucléique cible, ou une séquence complémentaire à celle-ci, qui est flanquée à l'extrémité 3' d'une séquence d'acide nucléique plus courte et à l'extrémité 5' d'une séquence d'acide nucléique complémentaire de cet acide nucléique, qui forment un double brin d'ADN et ainsi un module séparable qui peut être séparé par une nucléase spécifique du double brin, et ledit acide nucléique sonde présentant un marqueur à l'autre extrémité; b) au moins un traitement avec au moins une nucléase spécifique du double brin; et c) détermination de la proportion du marqueur qui s'est lié à la phase solide après l'étape b).

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