Multiple capillary biochemical analyzer with barrier member

G - Physics – 01 – N

Patent

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Details

G01N 21/63 (2006.01) G01N 21/05 (2006.01) G01N 27/447 (2006.01)

Patent

CA 2245167

A multiple capillary biochemical analyzer for sequencing DNA and performing other analyses, in which a set of capillaries extends from wells (30) in a microtiter plate (32) into a cuvette (22). In the cuvette (22) the capillaries are held on fixed closely spaced centers by passing through a sandwich construction having a pair of metal shims (64, 66) which squeeze between them a rubber gasket (84) forming a leak (See formula I) proof seal for an interior chamber in which the capillary ends are positioned. Sheath fluid enters the chamber and entrains filament sample streams from the capillaries. The filament sample streams, and sheath fluid, flow through aligned holes in a barrier member (90) spaced close to the capillary ends, into a collection chamber (102) having a lower glass window (100). The filament streams are illuminated above the barrier member by a laser (130) causing them to fluoresce. The fluorescence is viewed end- on by a CCD camera chip ( 138) located below the glass window ( 100). The arrangement ensures an equal optical path length from all fluorescing spots to the CCD chip and also blocks scattered fluorescence illumination, providing more uniform results and an improved signal to noise ratio.

La présente invention concerne un analyseur biochimique à capillaires multiples pour le séquençage de l'ADN et l'exécution d'autres analyses, dans lequel un ensemble de capillaires passe de puits (30), dans une plaque de microtitration (32), à une cuve (22). Dans la cuve (22), les capillaires sont maintenus sur des centres fixes, proches les uns des autres, du fait qu'ils traversent une structure en sandwich présentant deux plaques métalliques intermédiaires (64, 66) qui compriment entre elles un joint en caoutchouc (84) qui assure l'étanchéité d'une chambre intérieure dans laquelle les extrémités des capillaires sont positionnées. Du liquide de gainage pénètre dans la chambre et entraîne des flux d'échantillons de filaments provenant des capillaires. Ces flux et le liquide de gainage passent par des trous alignés dans un élément d'arrêt (90) placé très près des extrémités des capillaires, et entrent dans une chambre de recueil (102) pourvue d'une fenêtre inférieure en verre (100). Les flux de filaments sont éclairés, au-dessus de l'élément d'arrêt, par un laser (130), ce qui provoque leur fluorescence. La fluorescence est vue en bout par une puce de caméra CCD (138) placée au-dessous de la fenêtre en verre (100). Ce montage assure une longueur du chemin optique qui est identique entre tous les points fluorescents et la puce CCD. En outre, il bloque l'éclairage par fluorescence diffuse, ce qui donne des résultats plus uniformes et une amélioration du rapport signal sur bruit.

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