C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
N
C12N 5/10 (2006.01) C07K 14/705 (2006.01) C07K 14/72 (2006.01) C12N 1/15 (2006.01) C12N 15/63 (2006.01) C12N 15/80 (2006.01) C12Q 1/02 (2006.01) G01N 33/50 (2006.01)
Patent
CA 2334215
According to the invention, transformed cell lines, for example of Ustilago maydis, are used for detecting interactions between GPC-receptors (receptors with seven transmembrane sites, which interact with guanyl nucleotide-binding, regulatory proteins) or GPC-receptor-controlled signal transmission systems and test substances (ligands, modulators), or for searching for substances which are capable of interacting with receptors or signal transmission systems of this type. The transformed cell lines have a GPC-receptor-controlled signal transduction path with positive feedback and are transformed in such a way that they express a heterologous GPC- receptor. The transformed cell lines also contain a reporter gene, the expression of which can be detected using measuring techniques and which is controlled by a promotor. Said promoter can be induced by stimulating a GPC-receptor, and is endogenous. The reporter gene is endogenous or heterologous.
Selon l'invention, pour mettre en évidence les interactions entre des récepteurs GPC (récepteurs comportant sept domaines transmembranaires qui sont en interaction avec des protéines régulatrices liant le nucléotide guanylique) ou avec des systèmes de transmission de signaux contrôlés par le récepteur GPC et des substances test (ligands, modulateurs) et pour rechercher des substances qui peuvent induire une interaction avec ce type de récepteurs ou de systèmes de transmission de signaux, il est prévu d'utiliser des lignées cellulaires transformées, par exemple de Ustilago maydis. Lesdites lignées cellulaires transformées présentent une voie de transduction de signaux contrôlée par le récepteur GPC, à rétroaction positive et se trouvent transformées, de manière à exprimer un récepteur GPC hétérologue. Les lignées cellulaires contiennent en outre un gène rapporteur dont l'expression peut être détectée selon des techniques de mesure. Ledit gène rapporteur est piloté par un promoteur inductible par stimulation d'un récepteur GPC. Le promoteur inductible par stimulation de récepteur est endogène et le gène rapporteur est endogène ou hétérologue.
Durrenberger Franz
Kessmann Helmut
Discovery Technologies Ltd.
Freedman & Associates
LandOfFree
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Profile ID: LFCA-PAI-O-1645037