Detecting molecular complexes

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – Q

Patent

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Details

C12Q 1/68 (2006.01) C40B 30/04 (2006.01) C40B 70/00 (2006.01) G01N 33/53 (2006.01)

Patent

CA 2619777

The invention provides methods and compositions for detecting the presence of, or for measuring amounts of, molecular complexes, particularly complexes comprising two or more proteins, such as receptor complexes of cell surface membranes. In one aspect of the invention, reagent pairs are provided that comprise a cleaving probe that specifically binds to at least one component of a molecular complex and one or more signaling reagents that specifically bind to one or more components of the molecular complex, at least one of which is different from the component to which the cleaving probe is attached. Each signaling reagent comprises a binding compound specific for a component of the molecular complex and a signaling polynucleotide attached thereto by a cleavable linkage. When the reagent pairs are bound to the same molecular complex, the cleaving probe may be induced to generate a reactive species that is capable of cleaving cleavable linkages within an effective proximity, thereby releasing a signaling polynucleotide by which the molecular complex is detected.

L'invention concerne des procédés et des compositions visant à détecter la présence, ou à en mesurer les quantités, de complexes moléculaires, notamment les complexes comprenant deux ou plusieurs protéines, tels que des complexes récepteurs de membrane de surface cellulaire. L'invention concerne dans un aspect des couples réactifs qui comportent une sonde de clivage qui se lie spécifiquement à un ou plusieurs composants d'un complexe moléculaire et à un ou plusieurs réactifs de signalisation qui se lient spécifiquement à un ou plusieurs composants du complexe moléculaire, dont un au moins est différent du composant auquel la sonde de clivage est rattachée. Chaque réactif de signalisation comporte un composé liant spécifique pour un composant du complexe moléculaire et un polynucléotide de signalisation qui lui est rattaché par une liaison clivable. Lorsque les couples réactifs sont liés au même complexe moléculaire, la sonde de clivage peut être induite à générer une espèce réactive qui est capable de cliver des liaisons clivables dans une proximité effective, libérant donc un polynucléotide de signalisation au travers duquel le complexe moléculaire est détecté.

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