Method of identifying energy transfer sensors for analytes

G - Physics – 01 – N

Patent

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Details

G01N 33/58 (2006.01) G01N 21/64 (2006.01) G01N 33/53 (2006.01) G01N 33/542 (2006.01) G01N 33/68 (2006.01)

Patent

CA 2462617

A method of identifying an analyte-ligand binding pair that exhibits non- radiative fluorescence resonance energy transfer (FRET) using a combinatorial library. The method includes a) obtaining an analyte binding ligand from a combinatorial library that includes ligands, and b) attaching a label at least one of the analyte binding ligand and an analyte~analogue with at least one of a first component and a second component of a non-radiative fluorescence resonance energy transfer donor-acceptor pair (FRET pair) such that FRET occurs when the analyte-analogue is bound to the analyte binding ligand, and a change in FRET occurs when the analyte-analogue is not bound to the analyte binding ligand. The method also includes contacting a combinatorial library of ligands, which are optionally labeled with a component of a FRET pair, with analyte-analogue, which is optionally labeled with a component of a FRET pair, and detecting the presence of FRET.

L'invention concerne un procédé d'identification d'une paire de liaison analyte-ligand présentant un transfert d'énergie de résonance de fluorescence (FRET) non radiatif à l'aide d'une bibliothèque combinatoire. Ledit procédé consiste a) à obtenir un ligand de liaison d'analyte d'une bibliothèque combinatoire comprenant des ligands, et b) à fixer un marqueur sur au moins un ligand de liaison d'analyte et un analogue d'analyte avec au moins un premier composant et un second composant d'une paire donneur-accepteur de transfert d'énergie de résonance de fluorescence non radiatif (paire FRET) de manière que le transfert d'énergie se produise lorsque l'analogue d'analyte est lié au ligand de liaison d'analyte, et qu'un changement se produise dans le transfert lorsque l'analogue d'analyte n'est pas lié au ligand de liaison d'analyte. Ledit procédé consiste également à mettre en contact une bibliothèque combinatoire de ligands, éventuellement marqués avec un composant d'une paire FRET, avec un analogue d'analyte, éventuellement marqué avec un composant d'une paire FRET, et à détecter la présence du transfert d'énergie FRET.

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