Method of identifying genes controlling differentiation

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – Q

Patent

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Details

C12Q 1/68 (2006.01) C12N 15/63 (2006.01) C12Q 1/04 (2006.01)

Patent

CA 2478986

A method for identifying the genetic factors responsible for cell differentiation based on expression cloning is described. To determine what genetic factor leads to the differentiation of a cell from a beginning cell type to a target cell type, a cDNA library is obtained, packaged in an expression vector and transformed into cells of the beginning cell type. The expression vector also preferable includes a marker gene system under the control of a tissue specific promoter operable in the tissue type of the target cell type. The transformed cells are then cultured until cell differentiation begins, then the culture is screened or selected to identify the cells which undergo differentiation toward the target cell type. By examining the cDNA insert in the differentiated cells, the genetic factor responsible for the differentiation process can be identified.

L'invention concerne un procédé d'identification des facteurs génétiques responsables de la différenciation cellulaire basée sur le clonage d'expression. Pour déterminer quel facteur génétique conduit à la différenciation d'une cellule à partir d'un type de cellule de départ à un type de cellule cible, une banque d'ADNc est obtenue, encapsidée dans un vecteur d'expression et transformée en cellules du type cellulaire de départ. Le vecteur d'expression comprend également, de préférence, un système de gène marqueur sous la commande d'un promoteur à spécificité tissulaire pouvant être utilisé dans le type de tissu du type cellulaire cible. Les cellules transformées sont ensuite mises en culture jusqu'à ce que la différenciation cellulaire commence, ensuite la culture est criblée ou soumise à sélection afin d'identifier les cellules subissant une différenciation vers le type cellulaire cible. Par l'examen de la pièce rapportée d'ADNc dans les cellules différenciées, le facteur génétique responsable du processus de différenciation peut être identifié.

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