Alphavirus-retrovirus vectors

Details Alphavirus-retrovirus vectors Alphavirus-retrovirus vectors

C - Chemistry, Metallurgy

12

N

C12N 15/86 (2006.01) A61K 48/00 (2006.01) C12N 5/16 (2006.01) C12N 7/01 (2006.01) C12N 15/867 (2006.01)

Patent

CA 2268353

The present invention relates to RNA vectors comprising alphavirus RNA having inserted therein a recombinant retrovirus genome containing a foreign RNA sequence encoding a biologically active substance. The vectors of the present invention provide for the high level expression of the recombinant retrovirus genome directly in the cell cytoplasm of eukaryotic cells. When coexpressed with structural proteins of the retrovirus, the recombinant genome can efficiently be packaged into infectious recombinant retrovirus, also called retrovirus vectors, which can transduce the foreign RNA into recipient cells. Most importantly this cytoplasmic expression system facilitates the efficient production of vectors containing foreign RNA comprising genes in combination with introns or other control elements of gene expression. Such vectors have been impossible or very difficult to produce by the conventional nuclear expression systems because of RNA splicing.

L'invention porte sur des vecteurs d'ARN faits d'alphavirus d'ARN contenant une séquence d'ARN étranger codant pour une substance biologiquement active. Les vecteurs de la présente invention produisent une forte expression du génome du rétrovirus de recombinaison directement dans le cytoplasme cellulaire des cellules eukaryotes. Lorsqu'il est co-exprimé avec les protéines structurelles du rétrovirus, le génome de recombinaison peut efficacement s'intégrer à des rétrovirus de recombinaison infectieux, également dit vecteurs de rétrovirus, qui peuvent transduire l'ARN étranger dans les cellules réceptrices. Ce système d'expression cytoplasmique facilite, ce qui est d'une très grande importance, la production efficace de vecteurs contenant l'ARN étranger et comportant des gènes combinés à des introns ou d'autres éléments contrôlant l'expression génique. De tels vecteurs ont été impossibles ou très difficiles à produire dans les systèmes classiques d'expression nucléaire en raison de l'épissage de l'ARN.

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