Method and kit for extracting prion protein

Details Method and kit for extracting prion protein Method and kit for extracting prion protein

C - Chemistry, Metallurgy

07

K

C07K 1/14 (2006.01) A23J 1/00 (2006.01) C07K 1/00 (2006.01) C07K 14/47 (2006.01) C12Q 1/00 (2006.01) G01N 33/53 (2006.01) G01N 33/68 (2006.01)

Patent

CA 2358285

A method for extracting prion protein from a biological material, e.g., an animal tissue or product. In a specific example, abnormal prion protein is extracted from homogenized sheep brain with hexafluoro-2-propanol. The hexafluoro-2-propanol is separated from the aqueous brain preparation by increasing the ionic strength of the aqueous solution. Prion protein in the organic extract can be further purified, or the extract can be tested, e.g., by immunoassay, for the presence of prion protein, and more particularly abnormal prion protein. The extraction process permits testing for the presence of abnormal prion protein, e.g., for diagnosis of transmissible spongiform encephalopathies (TSE). The figure shows chromatogram from HILIC of I-prion protein as detected by radioactivity which is represented by open circles and by absorbance at 280 nm as represented by solid line in the graph.

L'invention concerne un procédé d'extraction de protéine prion contenue dans une substance biologique telle qu'un tissu animal ou un produit animal. Dans un exemple spécifique, une protéine prion anormale est extraite d'un cerveau de brebis homogénéisé avec de l'hexafluoro-2-propanol, que l'on sépare de la préparation aqueuse à base de cerveau en augmentant la force ionique de la solution. Les protéines prions présentes dans cet extrait organique peuvent être encore purifiées, mais il est également possible d'analyser cet extrait, notamment par dosage immunologique, afin de détecter la présence de protéines prions et plus particulièrement de protéines prions anormales. Le processus d'extraction permet d'analyser la présence de protéine prion anormale, notamment en vue de diagnostiquer des encéphalopathies spongiformes transmissibles (TSE). La figure montre un chromatogramme obtenu à partir de la chromatographie par interactions hydrophiles (HILIC) de protéine prion-I détectée par la radioactivité, représentée par des cercles, et par l'absorbance à 280 nm, représentée en trait plein sur le graphique.

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