Coenzyme-linked glucose dehydrogenase and polynucleotide...

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N

Patent

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C12N 15/09 (2006.01) C12M 1/00 (2006.01) C12N 1/15 (2006.01) C12N 1/19 (2006.01) C12N 1/21 (2006.01) C12N 5/10 (2006.01) C12N 9/04 (2006.01) C12Q 1/32 (2006.01)

Patent

CA 2604507

[PROBLEMS] To provide means for the mass production of a coenzyme-linked glucose dehydrogenase which has excellent substrate-recognizing ability against glucose and hardly acts on maltose. [MEANS FOR SOLVING PROBLEMS] A polynucleotide encoding a soluble coenzyme-linked glucose dehydrogenase which can catalyze the oxidation of glucose in the presence of an electron acceptor and has the degree of effect on maltose of 5% or lower; a polypeptide encoded by the nucleotide sequence of the polynucleotide; a recombinant vector carrying the polynucleotide; a transformed cell produced using the recombinant vector; a method for producing a polypeptide comprising culturing the transformed cell and collecting, from the resulting culture, a polypeptide which can link to FAD to exert the glucose dehydrating effect; a method for the determination of glucose using the polypeptide; a reagent composition for use in the determination of glucose; and a biosensor.

Le problème à résoudre dans le cadre de cette invention concerne l'obtention d'un moyen de production de masse d'une glucose déshydrogénase liée à une co-enzyme ayant une excellente capacité de reconnaissance du substrat de glucose et agissant à peine sur le maltose. La solution proposée consiste en un polynucléotide codant pour une glucose déshydrogénase liée à une co-enzyme soluble, qui peut catalyser l'oxydation du glucose en présence d'un accepteur d'électron, avec un degré d'effet sur le maltose de 5 % ou moins ; un polypeptide codé par la séquence de nucléotides du polynucléotide ; un vecteur recombinant porteur du polynucléotide ; une cellule transformée produite au moyen du vecteur recombinant ; un procédé de production d'un polypeptide impliquant la culture de la cellule transformée et le prélèvement, dans la culture produite, d'un polypeptide capable de se lier au FAD pour exercer l'effet déshydratant du glucose ; un procédé de détermination du glucose au moyen du polypeptide ; une composition réactive permettant la détermination du glucose ; et un biocapteur.

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