Synthetic 5'utrs, expression vectors, and methods for...

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N

Patent

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C12N 15/113 (2010.01) C12N 15/63 (2006.01) C12N 15/79 (2006.01) C12N 15/55 (2006.01)

Patent

CA 2715078

The present invention provides synthetic 5'UTRs comprising a first polynucleotide fragment and a second polynucleotide fragment, wherein the first polynucleotide fragment comprises at least one splice site of a first eukaryotic gene, the second polynucleotide fragment comprises at least a portion of 5' untranslated region of a second eukaryotic gene, and the first polynucleotide fragment is located 5' of the second polynucleotide fragment. In one embodiment, the first polynucleotide fragment comprises the second intron of a sarcoplasmic/endoplasmic reticulum calcium ATPase gene and the second polynucleotide fragment comprises at least a portion of the 5' untranslated region (5'UTR) of a eukaryotic casein gene. The synthetic 5'UTRs are useful for increasing the expression of a transgene when positioned between a promoter and a transgene within an expression vector. The present invention also provides vectors comprising synthetic 5'UTRs and methods for increasing the expression of a transgene using synthetic 5'UTRs.

La présente invention concerne des 5'UTR de synthèse comprenant un premier fragment polynucléotidique et un second fragment polynucléotidique, le premier fragment polynucléotidique comprenant au moins un site d'épissage d'un premier gène eucaryote, le second fragment polynucléotidique comprenant au moins une partie de la région non traduite 5' d'un second gène eucaryote, et le premier fragment polynucléotidique étant localisé en position 5' du second fragment polynucléotidique. Dans un mode de réalisation, le premier fragment polynucléotidique comprend le second intron d'un gène de calcium ATPase du réticulum sarcoplasmique/endoplasmique et le second fragment polynucléotidique comprend au moins une partie de la région non traduite 5' (5'UTR) d'un gène de la caséine eucaryote. Les 5'UTR synthétiques sont utiles pour augmenter l'expression d'un transgène une fois positionnés entre un promoteur et un transgène à l'intérieur d'un vecteur d'expression. La présente invention concerne également des vecteurs comprenant des 5'UTR synthétiques et des procédés pour augmenter l'expression d'un transgène en utilisant des 5'UTR synthétiques.

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