Cell lines for production of replication-defective adenovirus

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N

Patent

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C12N 5/00 (2006.01) C12N 5/16 (2006.01)

Patent

CA 2590943

The present invention provides cell lines for the production of E1-deleted adenovirus (rAd) vectors that complement E1A and E1B functions. The present invention also provides cell lines for the production of E1- and E2-deleted adenovirus vectors that complement E1A, E1B and E2B polymerase functions. The invention provides particular cell lines that complement E1A function by insertion of an E1A sequence containing mutations in the 243R and 289R proteins and an E1B sequence comprising the E1B-55K gene. Production yields in the resulting producer cell lines, designated SL0003 and SL0006, were similar to those obtained from 293 cells without generation of detectable recombinant replication competent adenovirus (~RCA~).

L'invention concerne des lignées cellulaires pour la production de vecteurs adénoviraux (rAd) délétés en E1 qui complètent les fonctions E1A et E1B. L'invention concerne également des lignées cellulaires pour la production de vecteurs adénoviraux délétés en E1 et en E2 qui complètent les fonctions polymérase E1A, E1B et E2B. L'invention concerne en outre des lignées cellulaires particulières qui complètent la fonction E1A par insertion d'une séquence E1A contenant des mutations dans les protéines 243R et 289R et d'une séquence E1B comprenant le gène E1B-55K. Les lignées cellulaires obtenues sont désignées SL0003 et SL0006, et sont identiques à celles obtenues à partir de 293 cellules sans génération d'adénovirus compétent pour la réplication recombiné et détectable ("RCA").

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