Site specific protein modification by mutagenesis

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N

Patent

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Details

C12N 15/28 (2006.01) A61K 47/48 (2006.01) C07K 1/107 (2006.01) C07K 14/715 (2006.01) C12N 15/12 (2006.01)

Patent

CA 2331337

Processes for conjugating proteins with polyethylene glycol are disclosed. The disclosed processes provide modified proteins having little or no decrease in their activity and include the steps of deleting at least one amino acid residue on the protein, replacing the at least one amino acid residue with an amino acid residue that does not react with polyethylene glycol, and contacting the protein with polyethylene glycol under conditions sufficient to conjugate the polyethylene glycol to the protein. This advantageous retention of a desired protein activity is attributed to the availability of one or more protein binding sites which is unaltered in the conjugation process and thus remains free to interact with a binding partner ligand or cognate subsequent to the conjugation process.

L'invention concerne des techniques permettant de conjuguer des protéines avec un polyéthylène glycol. Ce procédé fournit des protéines modifiées présentant une faible ou aucune réduction de leur activité, et consiste à supprimer au moins un résidu d'amino acide sur la protéine, à remplacer ce résidu par un résidu d'amino acide qui ne réagit pas avec le polyéthylène glycol, et à mettre la protéine en contact avec le polyéthylène glycol dans des conditions suffisantes pour conjuguer la protéine et le polyéthylène glycol. La rétention avantageuse d'une activité de protéine désirée est attribuée à l'aptitude d'un ou plusieurs sites de liaison de protéine qui ne sont pas altérés par le procédé de conjugaison, et qui n'interagissent donc pas avec un ligand partenaire de liaison ou un parent après le procédé de conjugaison.

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