C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
N
C12N 15/82 (2006.01) A01H 5/00 (2006.01) C07K 14/415 (2006.01) C12N 5/04 (2006.01) C12N 15/29 (2006.01)
Patent
CA 2323789
Alfin1 cDNA encodes a putative transcription factor associated with salt tolerance in alfalfa (Medicago sativa L). The recombinant protein binds DNA in a sequence specific manner, including promoter fragments of the salt inducible gene MsPRP2. Alfin1 function was tested in transgenic alfalfa under the control of the 35S promoter in the sense and antisense orientations with the endogenous MsPRP2 as a reporter gene. Calli overexpressing Alfin1 were more resistant to growth inhibition by 171 mM NaCl than vector transformed controls, while calli expressing Alfin1 antisense were more sensitive to salt inhibition. Transgenic plants overexpressing Alfin1 in the sense orientation grew well. In contrast, the antisense transgenic plants grew poorly in soil, demonstrating that Alfin1 expression is essential for normal plant development. Transgenic calli and plant roots overexpressing Alfin1 showed enhanced levels of endogenous MsPRP2 mRNA accumalution. However, MsPRP2 mRNA accumulation was also regulated in a tissue specific manner as shown in leaves of transgenics overexpressing Alfin1. These results suggest that Alfin1 acts as a transcriptional regulator in plants and MsPRP2 expression in alfalfa. Alfin1 overexpressing transgenics showed salinity tolerance comparable to one of our salt-tolerant plants, indicating that Alfin1 also functions in gene regulation in salt tolerance.
L'ADNc du gène Alfin1 code pour un facteur de transcription potentiel associé à la tolérance au sel chez alfalfa (Medicago sativa L). La protéine recombinée se lie à l'ADN de manière spécifique par rapport aux séquences, y compris à des fragments de promoteur du gène MsPRP2 pouvant présenter une tolérance induite au sel. La fonction d'Alfin1 a été testée dans de l'alfalfa transgénique sous la commande du promoteur 35S dans les orientations sens et antisens, en utilisant MsPRP2 endogène comme gène rapporteur. Des cals surexprimant Alfin1 présentent une résistance plus élevée à une inhibition de croissance par 171 mM NaCl que par des éléments de commande transformés par un vecteur, alors que des cals exprimant l'antisens d'Alfin1 dans l'orientation sens sont plus sensibles à une inhibition de sel. Des plantes transgéniques surexprimant Alfin1 dans l'orientation sens présentaient une bonne croissance. Au contraire, les plantes transgéniques antisens présentent une faible croissance dans le sol, ce qui prouve que l'expression d'Alfin1 est essentielle pour le développement de plantes normales. Des cals et des racines de plantes transgéniques surexprimant Alfin1 présentent des taux élevés d'accumulation d'ARNm de MsPRP2 endogène. Cependant, l'accumulation d'ARNm de MsPRP2 est également régulée dans un tissu de manière spécifique, comme le montrent les feuilles de plantes transgéniques surexprimant Alfin1. Ces résultats suggèrent qu'Alfin1 agit comme régulateur de transcription chez les plantes et de l'expression de MsPRP2 chez alfalfa. Des plantes transgéniques surexprimant Alfin1 présentent une tolérance à la salinité comparable à celle d'une de nos plantes tolérantes au sel, ce qui indique qu'Alfin1 agit également dans la régulation de gènes de tolérance au sel.
Arizona Board Of Regents Acting On Behalf Of Arizona State University
Borden Ladner Gervais Llp
LandOfFree
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