C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
N
C12N 9/28 (2006.01) C07K 19/00 (2006.01) C12N 1/15 (2006.01) C12N 1/21 (2006.01) C12N 15/56 (2006.01)
Patent
CA 2746118
Hybrid alpha-amylases are provided that share a conserved 3D structure in whole or in part with a wild-type Termamyl-like ?-amylase, e.g., a Bacillus amylase. In the hybrid, an N terminal portion of a Termamyl-like ?-amylase is replaced with sequences from an archae ? amylase. The sequence similarity between the two amylase sequences may be less than 60%. Conserving the wild-type 3D structure in the hybrid facilitates obtaining enzymatically active amylases. In one embodiment, one or both amylase sequences contribute residues to the B domain, resulting in particularly advantageous properties. For instance, replacement of the Ca2+ binding site in the B domain of the Termamyl-like ?-amylase with a B domain sequence of an archae ? amylase that does not bind Ca2+ can produce a hybrid that is fully active in the absence of Ca2+.
L'invention concerne des alpha-amylases hybrides qui partagent une structure 3D conservée en totalité ou en partie avec une alpha-amylase de type Termamyl sauvage, par exemple une amylase de Bacillus. Dans l'hybride, la partie N-terminale de l'alpha-amylase de type Termamyl est remplacée par des séquences d'alpha-amylase d'archéobactérie. La similitude de séquence entre les deux séquences d'amylase peut être inférieure à 60 %. La conservation de la structure 3D sauvage dans l'hybride facilite l'obtention d'amylases enzymatiquement actives. Dans un mode de réalisation, l'une ou les deux séquences d'amylase contribuent par des résidus au domaine B, ce qui donne des propriétés particulièrement avantageuses. Par exemple, le remplacement du site de liaison de Ca2+ dans le domaine B de l'alpha-amylase de type Termamyl par une séquence de domaine B d'une alpha-amylase d'archéobactérie qui ne lie pas Ca2+ peut produire un hybride qui est pleinement actif en l'absence de Ca2+.
Power Scott D.
Shaw Andrew
Bereskin & Parr Llp/s.e.n.c.r.l.,s.r.l.
Danisco Us Inc.
LandOfFree
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Profile ID: LFCA-PAI-O-1846945