Method of quantifying cholesterol in high density...

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – Q

Patent

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Details

C12Q 1/60 (2006.01) C12Q 1/26 (2006.01) C12Q 1/44 (2006.01) G01N 33/92 (2006.01)

Patent

CA 2481851

A method comprising the first step of eliminating cholesterols in lipoproteins other than HDL and the second step of specifically quantifying HDL cholesterol, whereby accurate data can be obtained even in the case of special samples concerning lipid metabolic disorders, lipoprotein disorders, etc. This method of quantifying cholesterol in high density lipoproteins comprises the first wherein a test sample is treated with cholesterol esterase and cholesterol oxidase in the absence of any surfactant acting on high density lipoproteins and the thus formed hydrogen peroxide is removed to thereby eliminate cholesterol in lipoproteins other than high density lipoproteins, and the second step wherein a surfactant acting specifically on high density lipoproteins is added to the product obtained in the step 1 and then cholesterol in the high density lipoproteins is quantified based on hydrogen peroxide formed by the actions of the cholesterol esterase and the cholesterol oxidase. As the cholesterol oxidase in the step 1, use is made of one having a molecular weight of 60 kD or less.

La présente invention concerne une méthode consistant tout d'abord à éliminer des cholestérols dans des lipoprotéines autres que des lipoprotéines de haute densité (HDL) et consistant ensuite à quantifier de manière spécifique le cholestérol HDL, ce qui permet d'obtenir ainsi des données précises même dans le cas d'échantillons spéciaux relatifs à des troubles métaboliques lipidiques, des troubles lipoprotéiniques, etc. Ladite méthode de quantification de cholestérol présent dans des lipoprotéines de haute densité consiste tout d'abord à traiter un échantillon pour essai à l'aide de cholestérol estérase et de cholestérol oxydase en l'absence de surfactant agissant sur des lipoprotéines de haute densité, le peroxyde d'hydrogène ainsi formé étant enlevé pour ainsi éliminer le cholestérol présent dans des lipoprotéines autres que des lipoprotéines de haute densité, et ensuite, à ajouter un surfactant agissant de manière spécifique sur les lipoprotéines de haute densité au produit obtenu lors de la première étape, le cholestérol présent dans les lipoprotéines de haute densité étant alors quantifié en fonction du peroxyde d'hydrogène formé par l'action de la cholestérol estérase et par celle de la cholestérol oxydase. La cholestérol oxydase utilisé lors de la première étape est de la cholestérol oxydase de poids moléculaire inférieur ou égal à 60 kD.

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