C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
N
C12N 1/21 (2006.01) C12N 9/10 (2006.01) C12N 9/12 (2006.01) C12N 9/92 (2006.01) C12N 15/11 (2006.01) C12N 15/63 (2006.01) C12N 15/74 (2006.01) C12N 15/90 (2006.01) C12P 7/04 (2006.01) C12P 7/06 (2006.01)
Patent
CA 2304929
The present invention briefly includes a transposon for stable insertion of foreign genes into a bacterial genome, comprising at least one operon having structural genes encoding enzymes selected from the group consisting of xylAxylB, araBAD and tal/tkt and at least one promoter for expression of the structural genes in the bacterium, a pair of inverted insertion sequences, the operons contained inside the insertion sequences and a transposase gene located outside of the insertion sequences. A plasmid shuttle vector for transformation of foreign genes into a bacterial genome, comprising at least one operon having structural genes encoding enzymes selected from the group consisting of xylAxylB, araBAD and tal/tkt, at least one promoter for expression of the structural genes in the bacterium and at least two DNA fragments having homology with a gene in the bacterial genome to be transformed, is also provided. The transposon and shuttle vectors are useful in constructing significantly different Zymomonas mobilis strains, according to the present invention, which are useful in the conversion of the cellulose derived pentose sugars into fuels and chemicals, using traditional fermentation technology, because they are stable for expression in a non-selection medium.
La présente invention comprend sommairement un transposon permettant l'insertion stable de gènes étrangers dans un génome bactérien, qui comprend au moins une opéron pourvue de gènes de structure codant les enzymes choisies parmi le groupe constitué des xylAxylB, araBAD et Tal / tkt et d'au moins un promoteur pour l'expression du gène de structure dans la bactérie, une paire de séquences d'insertion inversée, des opérons contenues à l'intérieur des séquences d'insertion et un gène de transposase situé en dehors des séquences d'insertion. Un vecteur navette du plasmide est également prévu pour la transformation de gènes étrangers dans un génome bactérien, comprenant au moins une opéron ayant des gènes de structure codant les enzymes choisies parmi le groupe constitué des xylAxylB, araBAD et Tal / tkt, au moins un promoteur pour l'expression des gènes de structure dans la bactérie et au moins deux fragments d'ADN ayant une homologie avec un gène du génome bactérien à transformer. Les vecteurs de transposon et de navette sont utiles dans la construction significativement différentes des souches Zymomonas mobilis, selon la présente invention, qui sont utiles dans la conversion de la cellulose dérivée des sucres pentoses dans les carburants et produits chimiques, en utilisant la technologie de fermentation traditionnelle, car ils sont stables pour l'expression dans un milieu de non-sélection.
Chou Yat-Chen
Zhang Min
Alliance For Sustainable Energy Llc
Finlayson & Singlehurst
Midwest Research Institute
LandOfFree
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