Method and assembly for rapid measurement of cell layers

G - Physics – 01 – N

Patent

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G01N 33/49 (2006.01) B01D 21/32 (2006.01) B04B 5/02 (2006.01) B04B 5/04 (2006.01) B04B 13/00 (2006.01) G01N 15/04 (2006.01) G01N 15/05 (2006.01) G01N 21/84 (2006.01) H04N 5/30 (2006.01)

Patent

CA 2230222

Centrifuged material layer volumes are measured and quantified during centrifugation of the material layers. The material layers are differentially highlighted, preferably by means of one or more fluorescent dyes or stains which are admixed with the sample being analyzed. This kinetic quantification procedure is particularly useful in performing differential blood cell and platelet counts. The blood sample is centrifuged while being subjected to a strobed light source. At least one photometric cell layer compaction measurement is made in conjunction with the light flashes so as to record a degree of cell layer compaction as the sample is being centrifuged. In certain cases, after several successive cell layer compaction readings are derived, a compaction curve is identified and the ultimate degree of cell layer compaction is calculated from the derived compaction curve prior to the achievement of the ultimate degree of cell layer compaction. Preferably, a sample of anticoagulated whole blood contained in a transparent tube is centrifuged so as to gravimetrically separate the various blood cell and other components by specific gravity. The tube may contain an insert or float which serves to elongate certain of the separated component layers. The various component layers may be periodically measured during the centrifugation step by a linear image dissector which can detect differential fluorescence in the several component layers. The blood component layers are caused to fluoresce by flashes of light which are directed toward the blood sample tube as the latter is being centrifuged. The gravimetric separation and quantification of blood sample constituent layers are thus both performed while the sample remans in the centrifuge. The ultimate degree of constituent layer compaction may be measured during centrifugation directly, or it can be extrapolated from a plurality of sequential preliminary measurements which are made during centrifugation prior to ultimate compaction being achieved.

Les volumes des couches de matériel centrifugé sont mesurés et quantifiés durant la centrifugation des couches de matériel. Les couches de matériel sont colorées différemment, de préférence au moyen de teintures ou de colorants fluorescents, qui sont mélangés à l'échantillon à analyser. La technique de quantification cinétique est particulièrement utile pour ce qui est d'effectuer des numérations différentielles des cellules sanguines et des plaquettes. L'échantillon de sang est centrifugé tout en étant soumis à une source lumineuse stroboscopique. Au moins une mesure de compactage photométrique des couches cellulaires est effectuée pendant les impulsions lumineuses de manière à enregistrer le degré de compactage des couches cellulaires à mesure que l'échantillon est centrifugé. Dans certains cas, après qu'on a obtenu plusieurs mesures successives du compactage des couches cellulaires, une courbe de compactage peut être établie et le degré ultime de compactage des couches est calculé à partir de la courbe de compactage obtenue avant qu'on parvienne au degré ultime de compactage des couches cellulaires. De préférence, on procède à la centrifugation d'un échantillon de sang total additionné d'anticoagulant contenu dans un tube transparent, de manière à séparer par gravimétrie les diverses cellules sanguines et autres composants selon leur gravité spécifique. Le tube peut contenir une pièce ou un flotteur servant à allonger certaines des couches de constituants séparées. Les diverses couches de constituants peuvent être mesurées périodiquement pendant la centrifugation par un analyseur d'images linéaire qui peut détecter la fluorescence différentielle dans les diverses couches de constituants. Les couches de constituants sanguins deviennent fluorescentes sous l'effet d'impulsions lumineuses qui sont dirigées vers le tube contenant l'échantillon sanguin pendant que celui est centrifugé. La séparation gravimétrique et la quantification des couches de constituants de l'échantillon de sang sont toutes deux effectuées pendant que l'échantillon se trouve dans le centrifugeur. Le degré ultime de compactage des couches de constituants peut être mesuré directement pendant la centrifugation ou encore il peut être extrapolé à partir d'un grand nombre de mesures préliminaires séquentielles effectuées durant la centrifugation, avant que le degré de compactage ultime ne soit atteint.

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