C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
N
C12N 9/24 (2006.01) C12N 5/10 (2006.01) C12N 15/56 (2006.01) C12N 15/85 (2006.01)
Patent
CA 2716055
The invention relates to the establishment of expression vectors replicable in a mammalian cell, including a DNA sequence encoding human prosaposin (PSAP) or Saposin Q operably linked with regulatory DNA capable of effecting the expression of the PSAP and Saposin C DNA coding sequence in the cells. In addition, the invention relates to mammalian cells (CHO-K1) stably transfected with such expression vectors and methods of producing human Saposin C or PSAP, including transfecting a mammalian cell with expression vectors, maintaining and propagating the cell in culture medium, and isolating soluble rh-Saposin C or rh-PSAP from the medium. Purified rh-Saposin C and rh-PSAP are useful as reagents for studying biological responses and signal transduction mechanism in benign or malignant cells, as standard proteins in diagnosis or screening of benign or malignant diseases, or as medicine for the treatment of diseases or disorders affecting musculoskeletal system or peripheral and central nervous system.
L'invention concerne l'établissement de vecteurs d'expression pouvant se répliquer dans une cellule de mammifère, comprenant une séquence d'ADN codant pour la prosaposine (PSAP) ou la saposine Q humaines liée de façon fonctionnelle à de l'ADN régulateur capable d'effectuer l'expression de la séquence codante d'ADN de PSAP et de la saposine C dans les cellules. De plus, l'invention concerne des cellules de mammifère (CHO-K1) transfectées de façon stable par de tels vecteurs d'expression, ainsi que des procédés de production de saposine C ou PSAP humaines, comprenant la transfection d'une cellule de mammifère par des vecteurs d'expression, la conservation et la propagation de la cellule en milieu de culture, et l'isolement de rh-saposine C ou rh-PSAP solubles à partir du milieu. rh-saposine C et rh-PSAP purifiées sont utiles en tant que réactifs pour étudier les réponses biologiques et un mécanisme de transduction de signal dans des cellules bénignes ou malignes, sous forme de protéines standard dans le diagnostic ou le criblage de maladies bénignes ou malignes, ou en tant que médicament pour le traitement de maladies ou de troubles ayant une incidence sur lappareil locomoteur ou sur le système nerveux périphérique et central.
Hu Siyi
Koochekpour Shahriar
Board Of Supervisors Of Louisiana State University And Agricultu
Deeth Williams Wall Llp
LandOfFree
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