Genetic modification of male germ cells for generation of...

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N

Patent

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C12N 15/89 (2006.01) C12N 5/076 (2010.01) A01K 67/027 (2006.01) A61K 48/00 (2006.01) C12N 5/10 (2006.01) C12N 15/09 (2006.01) C12N 15/86 (2006.01) C12N 15/867 (2006.01) C12N 15/87 (2006.01) A61K 35/52 (2006.01)

Patent

CA 2368620

Disclosed is an in vivo method of incorporating exogenous genetic material into the genome of a vertebrate, which involves administering to a male vertebrate's testis a gene delivery mixture comprising a viral vector, such as a retroviral vector, to deliver a polynucleotide encoding a desired trait or product. Also disclosed is an in vitro method of incorporating exogenous genetic material into the genome of a vertebrate, in which germ cells are obtained from a donor male vertebrate and are genetically modified in vitro, before being transferred to a recipient male vertebrate. After the transfer, the male vertebrate bearing the genetically modified germ cells is bred with a female vertebrate such that a transgenic progeny is produced that carries the polynucleotide in its genome. Also disclosed are non-human transgenic vertebrates produced in accordance with the method, including transgenic progeny. A transgenic cell derived from the transgenic vertebrate is also disclosed, being a germ cell, such as a spermatozoan or ovum, a precursor cell of either of these, or a somatic cell. A method of producing a non-human transgenic vertebrate animal line comprising native germ cells carrying in their genome at least one xenogeneic polynucleotide is disclosed, as is vertebrate semen containing the transgenic male germ cells useful in practicing the method.

Cette invention a trait à une technique in vivo d'incorporation de matériel génétique exogène au génome d'un vertébré, consistant à administrer au testicule de ce vertébré mâle un mélange d'apport de gène comportant un vecteur viral, tel qu'un vecteur rétroviral, pour apporter un polynucléotide codant un trait ou un produit désiré. L'invention porte également sur une technique in vitro d'incorporation de matériel génétique exogène au génome d'un vertébré, les cellules germinales étant obtenues à partir d'un donneur vertébré mâle et modifiées par voie génétique in vitro avant leur transfert vers le vertébré mâle destinataire. Après transfert, le vertébré mâle porteur des cellules germinales modifiées par voie génétique est mis à s'accoupler avec un vertébré femelle de manière à produire une descendance transgénique porteuse du polynucléotide dans son génome. L'invention concerne également des vertébrés transgéniques non humains produits grâce à cette technique, y compris la descendance transgénique. Cette invention porte, en outre, sur une cellule transgénique dérivée du vertébré transgénique, en l'occurrence une cellule germinale, telle qu'un spermatozoïde ou un embryon, une cellule précurseur de l'un ou de l'autre de ces derniers ou une cellule somatique. L'invention concerne, de surcroît, une technique de production de lignée d'animal vertébré transgénique comportant des cellules germinales d'origine porteuses dans leur génome d'au moins un polynucléotide exogène, la semence transgénique contenant les cellules germinales mâles utilisées dans la mise en oeuvre de cette technique.

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