C - Chemistry – Metallurgy – 12 – Q
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
Q
C12Q 1/68 (2006.01)
Patent
CA 2267642
A method for detecting a mutated nucleic acid and/or DNA fragment which comprises hybridizing a nucleic acid fragment, etc. immobilized on a plate with another nucleic acid fragment, etc. to be examined in the presence of the mutation, binding the thus formed inappropriate base pair to a substance capable of binding specifically to the inappropriate base pair, such as labeled Mut S, and then detecting and identifying the fragment to which the above substance has been bound; a method which comprises treating, in place of the above substance capable of binding specifically to the inappropriate pair, an inappropriate base pair formed between hybridized fragments with a substance capable of specifically recognizing and cleaving the inappropriate base pair, thus cleaving or removing the hybridized fragment starting with the inappropriate base pair, labeling the fragment remaining on a plate after the cleavage or removal, and then detecting and identifying the thus labeled fragment; and substances capable of binding specifically to an inappropriate base pair such as GFP-labeled Mut S. Thus, structural mutations in two or more genes can be detected in parallel. In particular, structural mutations can be detected while monitoring the extent of expression simultaneously.
L'invention concerne un procédé de détection d'un acide nucléique et/ou fragment d'ADN ayant subi une mutation, consistant à hybrider un fragment d'acide nucléique, immobilisé sur une plaque, avec un autre fragment d'acide nucléique à examiner pour la présence de la mutation, à fixer la fausse paire de bases ainsi formée sur une substance capable de se fixer de manière spécifique sur ladite paire, telle que Mut S marquée, puis à détecter et à identifier le fragment sur lequel la substance s'est fixée. L'invention concerne un procédé consistant à traiter, au lieu de la substance ci-dessus capable de se fixer de manière spécifique sur la fausse paire, une fausse paire formée de fragments hybridés, au moyen d'une substance capable de reconnaître et de cliver de manière spécifique cette fausse paire de bases, clivant ainsi le fragment hybridé ou l'enlevant de la fausse paire de bases, à marquer le fragment restant sur une plaque après clivage ou enlèvement, et à détecter et identifier le fragment ainsi marqué. L'invention concerne encore des substances capables de se fixer spécifiquement sur une fausse paire de bases, comme GFP-Mut S marquée. Ainsi, il est possible de détecter parallèlement des mutations structurelles dans deux gènes ou davantage, et notamment de détecter des mutations tout en surveillant en même temps l'étendue de l'expression.
Dennison Associates
Hayashizaki Yoshihide
The Institute Of Physical And Chemical Research
LandOfFree
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Profile ID: LFCA-PAI-O-1925587