Method and device for protein delivery into cells

G - Physics – 01 – N

Patent

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G01N 33/50 (2006.01) C12N 5/08 (2006.01) C12N 15/00 (2006.01) C12N 15/88 (2006.01) G01N 33/68 (2006.01)

Patent

CA 2493745

Methods for performing surface-mediated protein delivery into living cells, and fabricating protein-transfected cell cluster arrays are provided. The method comprises providing a protein-containing mixture; depositing said protein-containing mixture onto a surface at defined locations; affixing the protein-containing mixture to the surface as microspots; and plating cells onto the surface in sufficient density and under conditions for the proteins to be delivered into the cells. The protein-containing mixture comprises any suitable amino acid sequence, including peptides, proteins, protein-domains, antibodies, or protein-nucleic acid conjugates, etc., with a carrier reagent. Protein-transfected cell arrays may be used for rapid and direct, screening of protein or enzymatic functions or any given intracellular protein interaction in the natural environment of a living cell, as well as for high-throughput screening of other biological and chemical analytes, which affect the functions of these proteins.

La présente invention se rapporte à des procédés permettant d'effectuer un transport de protéines à médiation par la surface dans des cellules vivantes, et de fabriquer des ensembles de groupes de cellules transfectées par des protéines. Le procédé consiste à utiliser un mélange contenant des protéines; à déposer ledit mélange contenant des protéines sur une surface en des emplacements définis; à fixer le mélange contenant les protéines sur la surface sous forme de micropoints; et à plaquer des cellules sur la surface en densité suffisante et dans des conditions permettant le transport des protéines à l'intérieur des cellules. Le mélange contenant les protéines comprend toute séquence d'acides aminés appropriée, notamment des peptides, des protéines, des domaines protéiques, des anticorps ou des conjugués acides nucléiques-protéines, etc., en association à un réactif support. Les ensembles de cellules transfectées par les protéines peuvent être utilisés pour permettre une détection rapide et directe de fonctions enzymatiques ou protéiques ou de toute interaction donnée de protéines intracellulaires dans l'environnement naturel d'une cellule vivante, ainsi que pour un criblage à haut rendement d'autres analytes biologiques et chimiques qui modifient les fonctions de ces protéines.

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