C - Chemistry – Metallurgy – 12 – Q
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
Q
C12Q 1/68 (2006.01)
Patent
CA 2412721
Methods for isothermal exponential amplification of a target polynucleotide are disclosed. The methods employ two transcription modules, the first module providing linear amplification resulting in RNA transcripts, and a second module providing for further (generally cyclical) amplification resulting in more RNA transcripts. In one aspect, the amplification for the first module is composite primer based. In a second aspect, the amplification of the first module is based on target switching to generate a primer extension product comprising a promoter sequence. In all aspects, the RNA transcripts of the first transcription module are subjected to further amplification by creating an intermediate product comprising a double stranded promoter region from which transcription can occur. The invention further provides compositions and kits for practicing said methods, as well as methods which use the amplification results.
L'invention concerne des procédés d'amplification exponentielle isothermique d'un polynucléotide cible. Les procédés consistent à utiliser deux modules de transcription. Le premier module fournissant une amplification linéaire permettant d'obtenir des produits de transcription de l'ARN, et un second module permettant d'effectuer une amplification supplémentaire (généralement cyclique) de manière à obtenir d'autres produits de transcription. Selon un aspect de l'invention, l'amplification du premier module est fondée sur une amorce composite. Selon un second aspect de l'invention, l'amplification du premier module est fondée sur la commutation ciblée afin de produire un produit d'extension d'amorce comprenant une séquence promoteur. Selon tous les aspects décrits dans cette invention, les produits de transcription de l'ARN du premier module de transcription sont soumis à une amplification supplémentaire par élaboration d'un produit intermédiaire comprenant une région promoteur à double brin à partir de laquelle la transcription peut avoir lieu. L'invention concerne également des compositions et des trousses permettant de mettre en oeuvre ces procédés, ainsi que des procédés utilisant les produits de l'amplification.
Borden Ladner Gervais Llp
Nugen Technologies Inc.
LandOfFree
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Profile ID: LFCA-PAI-O-1948169