Quantitative immunochromatographic assays

G - Physics – 01 – N

Patent

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Details

G01N 33/558 (2006.01)

Patent

CA 2250242

Quantitative im- munochromatographic assays for measuring the amount of an analyte, and an apparatus for use in the assays, are disclosed. The assays involve obtaining a fluid sample which contains the analyze; supplying a RAMP.TM. apparatus which includes a membrane having an application point, a detection zone, and a contact region, where the contact region is between the application point and the detection zone, and has antibody-coated particles imbedded within it; contacting the application point with the fluid sample; maintaining the RAMP.TM. apparatus under conditions sufficient to allow fluid to transport analyte by capillary action to the contact region, where the analyte binds to the antibody-coated particles; further maintaining the apparatus under conditions sufficient to allow fluid to transport analyte- bound antibody-coated particles to the detection zone, where they interact with a detection reagent; and detecting the amount of analyte- bound antibody-coated particles which have reacted with the detection reagent. Alternatively, the fluid sample can be contacted with the detection zone of the apparatus, and the antibody-coated particles are mobilized by addition of fluid to the application point. The RAMP.TM. apparatus can additionally include one or more of the following features: a wicking pad; an application pad covering the application point; a contact pad covering the contact region; a separator pad between the membrane and the contact pad; and an internal control.

L'invention concerne des dosages immunochromatographiques quantitatifs servant à mesurer la quantité d'un analyte et un appareil utilisé pour ces dosages. Les dosages se font selon les étapes suivantes: obtention d'un échantillon d'un fluide contenant l'analyte; mise en place d'un appareil RAMP<TM>, lequel comprend une membrane ayant un point d'application, une zone de détection et une région de contact, celle-ci étant située entre le point d'application et la zone de détection et ayant des particules recouvertes d'anticorps qui y sont incluses; mise en contact du point d'application et de l'échantillon de fluide; maintien de l'appareil RAMP<TM> dans des conditions permettant au fluide de véhiculer l'analyte par capillarité jusqu'à la région de contact, où l'analyte se lie aux particules recouvertes d'anticorps; maintien de l'appareil dans des conditions permettant au fluide de véhiculer les particules recouvertes d'anticorps et liées par analyte jusqu'à la zone de détection, où elles interagissent avec un réactif de détection; détection de la quantité de particules recouvertes d'anticorps et liées par analyte qui a réagi avec le réactif de détection. Dans un autre mode de réalisation, l'échantillon de fluide peut être mis en contact avec la zone de détection de l'appareil et les particules recouvertes d'anticorps sont mobilisées par une addition de fluide sur le point d'application. L'appareil RAMP<TM> peut en outre comprendre un des éléments suivants ou plusieurs d'entre eux, à savoir: un tampon à effet de mèche; un tampon d'application couvrant le point d'application, un tampon de contact couvrant la région de contact, un tampon de séparation placé entre la membrane et le tampon de contact et une commande intérieure.

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