Protein production and delivery

Details Protein production and delivery Protein production and delivery

C - Chemistry, Metallurgy

12

N

C12N 15/67 (2006.01) A61K 31/70 (2006.01) A61K 35/12 (2006.01) A61K 38/19 (2006.01) A61K 38/21 (2006.01) A61K 38/46 (2006.01) A61K 48/00 (2006.01) C07K 14/52 (2006.01) C07K 14/565 (2006.01) C12N 5/10 (2006.01) C12N 9/16 (2006.01) C12N 15/19 (2006.01) C12N 15/22 (2006.01) C12N 15/55 (2006.01) C12N 15/90 (2006.01) A61K 38/00 (2006.01)

Patent

CA 2215618

The invention relates to novel human DNA sequences, targeting constructs, and methods for producing novel genes encoding thrombopoietin, DNase I, and .beta.- interferon by homologous recombination. The targeting constructs comprise at least: (a) a targeting sequence; (b) a regulatory sequence; (c) an exon; and (d) a splice-donor site. The targeting constructs, which can undergo homologous recombination with endogenous cellular sequences to generate a novel gene, are introduced into cells to produce homologously recombinant cells. The homologously recombinant cells are then maintained under conditions which will permit transcription of the novel gene and translation of the mRNA produced, resulting in production of either thrombopoietin, DNase I, or .beta.- interferon. The invention further relates to methods of producing pharmaceutically useful preparations containing thrombopoietin, DNase I, or .beta.-interferon from homologously recombinant cells and methods of gene therapy comprising administering homologously recombinant cells producing thrombopoietin, DNase I, or .beta.-interferon to a patient for therapeutic purposes.

L'invention porte sur de nouvelles séquences ADN humaines, de nouvelles constructions de ciblage et sur des méthodes d'obtention de nouveaux gènes codant la thrombopoïétine, une DNase I, et un .beta.-interféron par recombinaison homologue. Les constructions de ciblage comprennent au moins: (a) une séquence de ciblage; (b) une séquence de régulation; (c) un exon; (d) un site épissage-donneur. Les constructions de ciblage, qui peuvent subir une recombinaison homologue avec des séquences cellulaires endogènes pour produire un gène nouveau, sont introduites dans des cellules pour produire des cellules de recombinaison homologues. Ces cellules de recombinaison homologues sont ensuite maintenues dans des conditions permettant la transcription du gène nouveau et la translation de l'ARNm produite, aboutissant à la production, soit de thrombopoïétine, soit de DNase I, soit de .beta.-interféron. L'invention porte en outre sur un procédé de production de préparations pharmaceutiquement utiles contenant de la thrombopoïetine, une DNase I ou un .beta.-interféron provenant de cellules de recombinaison homologue ainsi que sur des méthodes de thérapie génique consistant à administrer des cellules de recombinaison homologues produisant de la thrombopoïetine, une DNase I ou un .beta.-interféron à un patient à des fins thérapeutiques.

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