Method of detecting gene mutation

Details Method of detecting gene mutation Method of detecting gene mutation

C - Chemistry, Metallurgy

12

N

C12N 15/09 (2006.01) C12Q 1/68 (2006.01) G01N 33/50 (2006.01) G01N 33/53 (2006.01) G01N 33/566 (2006.01) G01N 33/58 (2006.01)

Patent

CA 2506654

DNA amplification and hybridization are successively carried out in a reaction system containing primers and hybridization probes for the DNA amplification, wherein at least one of the primers to be used in the DNA amplification is labeled with a first labeling agent so that the amplified DNA is labeled with the first labeling agent, a hybridization probe is labeled with a second labeling agent and contained in a reaction liquor for effecting the DNA amplification, the base sequence of the hybridization probe is designed so as to not inhibit the DNA amplification, and a hybrid is detected by affinity chromatography with the use of the first and second labeling agents, thereby detecting the hybrid in the reaction liquor by affinity chromatography.

L'invention concerne une amplification et une hybridation d'ADN effectuées avec succès dans un système réactionnel contenant des amorces et des sondes d'hybridation pour une amplification d'ADN. Au moins une amorce destinée à être utilisée dans l'amplification d'ADN est marquée au moyen d'un premier agent de marquage de sorte que l'ADN amplifié est marqué avec ce premier agent de marquage, une sonde d'hybridation est marquée au moyen d'un second agent de marquage et est contenue dans une liqueur réactionnelle permettant de réaliser l'amplification d'ADN, la séquence de base de la sonde d'hybridation est conçue de sorte à ne pas inhiber l'amplification d'ADN, et un hybride est détecté par chromatographie d'affinité en faisant appel à l'utilisation du premier agent de marquage et du second agent de marquage, ce qui permet de détecter l'hybride dans la liqueur réactionnelle par chromatographie d'affinité.

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