Diagnostic testing process

Details Diagnostic testing process Diagnostic testing process

G - Physics

01

N

G01N 33/543 (2006.01) B01L 3/00 (2006.01) G01N 33/553 (2006.01)

Patent

CA 2469935

A method and apparatus for use in a flow through assay process is disclosed. The method is characterised by a "pre-incubation step" in which the sample which is to be analysed (typically for the presence of a particular protein), and a detection analyte (typically one or more antibodies bound to colloidal gold or a fluorescent tag) which is known to bind to the particular protein may bind together for a desired period of time. This pre-incubation step occurs before the mixture of sample and detection analyte come into contact with a capture analyte bound to a membrane. The provision of the pre- incubation step has the effect of both improving the sensitivity of the assay and reducing the volume of sample required for an assay. An apparatus for carrying out the method is disclosed defining a pre-incubation chamber for receiving the sample and detection analyte having a base defined by a membrane and a second membrane to which a capture analyte is bound. In one version the pre-incubation chamber is supported above the second membrane in one position but can be pushed into contact with the membrane carrying the capture analyte thus permitting fluid transfer from the incubation chamber through the capture membrane. In another version the membrane at the base of the incubation chamber is hydrophobic and its underside contacts the capture membrane and when a wetting agent is applied to the contents of the pre-incubation chamber fluid transfer occurs.

L'invention concerne un procédé et un dispositif s'utilisant dans un système d'essai en écoulement continu. Le procédé se caractérise par une <= étape de pré-incubation >= dans laquelle l'échantillon à analyser, (de manière générale en présence d'une protéine particulière), et par l'utilisation d'un analyte de détection (de manière générale un ou plusieurs anticorps liés à de l'or colloïdal ou à une étiquette fluorescente) qui est connu pour se fixer à la protéine particulière, les deux pouvant être combinés pour une période voulue. L'étape de pré-incubation intervient avant que le mélange de l'échantillon et de l'analyte de détection n'entre en contact avec un analyte de capture lié à la membrane. Le fait de prévoir une étape de pré-incubation a pour double effet de renforcer la sensibilité de l'essai et de réduire le volume d'échantillon requis pour un essai. L'invention concerne également un dispositif permettant de mettre ledit procédé en oeuvre, qui définit une chambre de pré-incubation pour recevoir l'échantillon et l'analyte de détection, qui comporte une base définie par une membrane et une seconde membrane à laquelle est liée un analyte de capture. Dans une version, la chambre de pré-incubation est maintenue au-dessus de la seconde membrane dans une position, mais peut être poussée pour être en contact avec la membrane portant l'analyte de capture, ce qui permet un transfert fluidique entre la chambre d'incubation à travers la membrane de capture. Dans une autre version, la membrane située au niveau de la base de la chambre d'incubation est hydrophobe et sa face inférieure est en contact avec la membrane de capture et le transfert fluidique s'effectue, lorsqu'un agent d'humidification est appliqué aux contenus de la chambre de pré-incubation.

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