C - Chemistry – Metallurgy – 12 – Q
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
Q
C12Q 1/68 (2006.01) C07H 21/02 (2006.01) C07H 21/04 (2006.01) C12P 19/34 (2006.01) C12P 21/08 (2006.01) G01N 33/53 (2006.01)
Patent
CA 2480525
The present invention provides novel methods of indirect analyte detection and quantification through amplification of oligonucleotide template attached to binding partners for analytes by nucleic acid amplification utilizing isothermal, single primer linear nucleic acid amplification methods. Methods of binding of binding partner that is attached to an oligonucleotide template to analyte, then amplifying at least a portion of the oligonucleotide template using a composite primer, primer extension, strand displacement, and optionally a termination sequence, are provided. Methods for amplifying sense RNA using a composite primer, primer extension, strand displacement, optionally template switching, a propromoter oligonucleotide and transcription are also provided. Methods for detecting and quantifying amplification products are also provided. The invention further provides compositions and kits for practicing said methods.
Cette invention a trait à de nouvelles techniques de détection et de quantification indirectes d'analysats par amplification d'une matrice nucléotidique rattachée à des partenaires de fixation en mesure de se lier aux analysats, lesquelles techniques utilisent une amplification linéaire isotherme d'acides nucléiques à amorce unique. L'invention concerne également des méthodes permettant de lier à un analysat un partenaire de fixation rattaché à une matrice polynucléotidique, puis à amplifier au moins une partie de la matrice oligonucléotidique au moyen d'une amorce composite, d'une extension d'amorce, d'un déplacement de brin et, éventuellement d'une séquence de terminaison. L'invention concerne, de surcroît, des méthodes d'amplification d'ARN sens, au moyen d'une amorce composite, d'une extension d'amorce, d'un déplacement de brin et, éventuellement, d'une inversion de matrice, d'un oligonucléotide à fonction de pro-promoteur et d'une transcription. Elle porte, en outre, sur des méthodes de détection et de quantification de produits d'amplification, ainsi que sur des compositions et des nécessaires servant à appliquer ces méthodes.
Dafforn Geoffrey A.
Kurn Nurith
Borden Ladner Gervais Llp
Nugen Technologies Inc.
LandOfFree
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Profile ID: LFCA-PAI-O-1993918